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限制性核酸內切酶可對什麼進行切割

發布時間: 2021-03-08 18:24:33

1. 限制性核酸內切酶是怎樣切割DNA的

不可以
限制性核酸內切酶是識別並切割特異的雙鏈dna序列的一種內切核酸酶。它能識別內雙鏈分子的某種特定核苷酸容序列,使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,而且只能切割dna,不能切割rna。另外,根據酶的專一性也能得出答案

2. 限制性內切酶能切割DNA單鏈嗎

1. 有少數限制性內切酶能切割DNA單鏈,效率滿低的。
2. 在末端加一些ggcc的和單雙鏈沒有關系,個人覺得和酶與DNA識別binding的結構有關。

3. 限制性核酸內切酶到底能切割什麼,什麼是限制性

不可抄以
限制性核酸內切酶是識別並切割特異的雙鏈dna序列的一種內切核酸酶。它能識別雙鏈分子的某種特定核苷酸序列,使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,而且只能切割dna,不能切割rna。另外,根據酶的專一性也能得出答案

4. 限制性內切酶可切割RNA嗎為什麼

限制性內切酶的全名叫 限制性核酸內切酶……既然是核酸,就包括DNA和RNA了,酶內的專一性有三種容,一個是底物專一性,一個是化學鍵專一性,一個是構象還是什麼玩意兒的專一性。不一定是只能催化嚴格意義上的一個反應的。
RNA一般是單鏈,用具有切割活性的一種RNA聚合酶來切割(就是tDNA轉錄出來mRNA,要經過切割形成tRNA,這些都在核內進行),雙鏈RNA也是存在的,介導RNA干擾現象。不需要RNA干擾的時候,雙鏈RNA肯定也要降解的。降解也需要酶……tRNA的二級結構里也有雙鏈的RNA片段。tRNA降解的時候肯定也要用到一些酶。它們也許不叫限制性內切酶。

總之LZ如果是高中生,遇到這種題就可以答限制性內切酶不可以切割RNA,為什麼?因為它是限制性內切酶……酶有專一性……而且高中時候學的限制酶就是基因工程切DNA的東西。這個這個……高中時候書上就是那樣寫的,照樣答就行了。

5. 限制性核酸內切酶切割DNA雙鏈後,可產生哪些切口,各有何特點

一個酶切可以產生平末端和粘性末端兩種,平末端連接起來較苦難,最好需要去磷酸化,防止自連,粘性末端連接比較簡單,效率更加高,連接目的片段方向固定!

6. 限制性核酸內切酶只能切割DNA不能切割RNA嗎

不可以
限制性核酸內切酶是識別並切割特異的雙鏈DNA序列的一種內切核酸酶回。它能識別雙鏈答分子的某種特定核苷酸序列,使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,而且只能切割DNA,不能切割RNA。另外,根據酶的專一性也能得出答案

7. 限制性核酸內切酶的切割位點和識別位點的區別

1、位置:

一條單鏈DNA上可能有多個識別位點,但一個識別位點只有一個酶切位點。

2、對稱性:

限制酶的識別位點大多數為迴文對稱結構,切割位點在 DNA 兩條鏈一定是相對稱的位置。

3、識別鹼基個數:

限制酶識別位點的長度一般為 4-8 個鹼基,切割位點只是識別兩個鹼基

(7)限制性核酸內切酶可對什麼進行切割擴展閱讀:

1、限制性核酸內切酶三種類型:

(1)第一型限制酶:

同時具有修飾及識別切割的作用;另有識別DNA上特定鹼基序列的能力,通常其切割位距離識別位可達數千個鹼基之遠。例如:EcoB、EcoK。

(2)第二型限制酶:

只具有識別切割的作用,修飾作用由其他酶進行。所識別的位置多為短的迴文序列;所剪切的鹼基序列通常即為所識別的序列。是遺傳工程上,實用性較高的限制酶種類。例如:EcoRI、HindⅢ。

(3)第三型限制酶:

與第一型限制酶類似,同時具有修飾及識別切割的作用。可識別短的不對稱序列,切割位與識別序列約距24-26個鹼基對。例如:HinfⅢ。

2、限制性核酸內切酶生理意義:

(1)實際就是限制酶降解外源DNA,維護宿主遺傳穩定的保護機制。

(2)甲基化是常見的修飾作用,可使腺嘌呤A和胞嘧啶C甲基化而受到保護。通過甲基化作用達到識別自身遺傳物質和外來遺傳物質的目的。

(3)能產生防禦病毒侵染的限制酶的細菌,其自身的基因組中可能有該酶識別的序列,只是該識別序列或酶切位點被甲基化了。

(4)不是說一旦甲基化了,所有限制酶都不能切割。大多數限制酶對DNA甲基化敏感,因此當限制酶目標序列與甲基化位點重疊時,對酶切的影響有3種可能,即不影響、部分影響、完全阻止。

(5)對甲基化DNA的切割能力是限制酶內在和不可預測的特性,因此,為有效的切割DNA,必須同時考慮DNA甲基化和限制酶對該類型甲基化的敏感性。

(6)另外,大部分商業限制酶如今專門用於切割甲基化DNA。

8. 限制性核酸內切酶切割的原理和方法

以DNA限制性核酸內切酶為例
1DNA限制性內切酶相關簡介編輯
生物體內能識別並切割特異的雙鏈序列的一種內切核酸酶。它是可以將外來的DNA切斷的酶,即能夠限制異源DNA的侵入並使之失去活力,但對自己的DNA卻無損害作用,這樣可以保護細胞原有的遺傳信息。由於這種切割作用是在DNA分子內部進行的,故名限制性內切酶(簡稱限制酶)。
2DNA限制性內切酶酶切原理編輯
限制性內切酶能特異地結合於一段被稱為限制性酶識別序列的DNA序列之內或其附近的特異位點上,並切割雙鏈DNA。它可分為三類:
Ⅰ類和Ⅲ類酶在同一蛋白質分子中兼有切割和修飾(甲基化)作用且依賴於ATP的存在。Ⅰ類酶結合於識別位點並隨機的切割識別位點不遠處的DNA,而Ⅲ類酶在識別位點上切割DNA分子,然後從底物上解離。
Ⅱ類由兩種酶組成: 一種為限制性內切核酸酶(限制酶),它切割某一特異的核苷酸序列; 另一種為獨立的甲基化酶,它修飾同一識別序列。Ⅱ類中的限制性內切酶在分子克隆中得到了廣泛應用,它們是重組DNA的基礎。絕大多數Ⅱ類限制酶識別長度為4至6個核苷酸的迴文對稱特異核苷酸序列(如EcoRⅠ識別六個核苷酸序列:5'- G↓AATTC-3'),有少數酶識別更長的序列或簡並序列。Ⅱ類酶切割位點在識別序列中,有的在對稱軸處切割,產生平末端的DNA片段(如SmaⅠ:5'-CCC↓GGG-3');有的切割位點在對稱軸一側,產生帶有單鏈突出末端的DNA片段稱粘性末端,如EcoRⅠ切割識別序列後產生兩個互補的粘性末端。
示意圖:
5'…G↓AATTC…3' →5'… G AATTC…3'
3'…CTTAA↑G …5' →3'… CTTAA G…5'

3影響因素編輯
影響條件
DNA純度、緩沖液、溫度條件及限制性內切酶本身都會影響限制性內切酶的活性。大部分限制性內切酶不受RNA或單鏈DNA的影響。
處理方法
當微量的污染物進入限制性內切酶貯存液中時,會影響其進一步使用,因此在吸取限制性內切酶時,每次都要用新的吸管頭。如果採用兩種限制性內切酶,必須要注意分別提供各自的最適鹽濃度。
若兩者可用同一緩沖液,則可同時水解。
若需要不同的鹽濃度,則低鹽濃度的限制性內切酶必須首先使用,隨後調節鹽濃度,再用高鹽濃度的限制性內切酶水解。也可在第一個酶切反應完成後,用等體積酚/氯仿抽提,加0.1倍體積3mol/L NaAc和2倍體積無水乙醇,混勻後置-70℃低溫冰箱30分鍾,離心、乾燥並重新溶於緩沖液後進行第二個酶切反應。
4DNA限制性內切酶酶切圖譜編輯
圖譜簡介
DNA限制性內切酶酶切圖譜,又稱DNA的物理圖譜,它由一系列位置確定的多種限制性內切酶酶切位點組成,以直線或環狀圖式表示。在DNA序列分析、基因組的功能圖譜繪制、DNA的無性繁殖、基因文庫的構建等工作中,建立限制性內切酶圖譜都是不可缺少的環節,近年來發展起來的RFLP(限制性片段長度多態性)技術更是建立在它的基礎上。
構建方法
構建DNA限制性內切酶圖譜有許多方法。通常結合使用多種限制性內切酶,通過綜合分析多種酶單切及不同組合的多種酶同時切所得到的限制性片段大小來確定各種酶的酶切位點及其相對位置。酶切圖譜的使用價值依賴於它的准確性和精確程度。
製作過程
在酶切圖譜製作過程中,為了獲得條帶清晰的電泳圖譜,一般DNA用量約為0.5-1μg。限制性內切酶的酶解反應最適條件各不相同,各種酶有其相應的酶切緩沖液和最適反應溫度(大多數為37℃)。對質粒DNA酶切反應而言,限制性內切酶用量可按標准體系1μg DNA加1單位酶,消化1-2小時。但要完全酶解則必須增加酶的用量,一般增加2-3倍,甚至更多,反應時間也要適當延長。希望能幫到你O(∩_∩)O哈哈~

9. 限制性核酸內切酶的切割

5指的是磷酸基團,3指的是羥基。鹼基與鹼基之間形成氫鍵,解旋酶和高溫加熱會打開。DNA是由許多脫氧核苷酸按一定鹼基順序彼此用3』,5』-磷酸二酯鍵相連構成的長鏈。

限制性核酸內切酶是可以識別DNA的特異序列,並在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類內切酶,簡稱限制酶。切割部位就是圖上的紅色線劃定的CUT之間的磷酸二 酯鍵。

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