等電點的測定用什麼儀器

⑴ 蛋白質等電點的測定（滿意還追加給分）

提個建議吧
在這里很難詳細達到你的要求
可以去CNKI或萬方去搜索你要專測定的蛋白質，屬然後輸入儀器型號。當然檢索項最好是摘要。
我當時做實驗的時候都是採用的這種方法。
不同的蛋白也會稍有不同。
如果你不方便下載全文或查詢，你可以告訴我你要做的蛋白或酶，我給你查詢。
另外如果你還是不想查的話
可以去生物谷裡面有很多實驗高手。
當然還是建議自己去查下，既然做這個實驗應該至少是碩士吧。

⑵ 解釋如何蛋白質等電點的測定

一、目的：
了解等電點的意義及其與蛋白質分子聚沉能力的關系。

二、原理：
蛋白質的分子量很大，它能形成穩定均一的溶液，主要是由於蛋白質分子都帶有相同符號的電荷，同時蛋白質分子周圍有一層溶劑化的水膜，避免蛋白質分子之間聚集而沉降。

蛋白質分子所帶的電荷與溶液的pH值有很大關系，蛋白質是兩性電解質，蛋白質在鹼性溶液中成陰離子，在酸性溶液中成陽離子：

蛋白質分子所帶凈電荷為零時的pH值稱為蛋白質的等電點（PI）。在等電點時，蛋白質分子在電場中不向任何一極移動，而且分子與分子間因碰撞而引起聚沉的傾向增加，所以這時可以使蛋白質溶液的粘度、滲透壓均減到最低，且溶液變混濁。若再加入一定量的溶劑如乙醇、丙酮，它們與蛋白質分子爭奪水分子，竭力減低蛋白質水化層的厚度而使混濁更加明顯。
各種蛋白質的等電點都不相同，但偏酸性的較多，如牛乳中的酪蛋白的等電點是4.7~4.8，血紅蛋白等電點為6.7~6.8，胰島素是5.3~5.4，魚精蛋白是一個典型的鹼性蛋白，其等電點在pH12.0~12.4。近年來蛋白質的等電點可以採用等電聚焦技術加以准確測定，但需一定的實驗條件。本實驗採用蛋白質在不同pH溶液中形成的混濁度來確定，即混濁度最大時的pH值即為該種蛋白質的等電點值，這個方法雖然不很准確，但在一般實驗條件下都能進行，操作也簡便。

四、操作步驟：
1．制備蛋白質膠液
（1）稱取酪蛋白3克，放在燒杯中，加入40℃的蒸餾水。
（2）加入50毫升1 mol·L-1氫氧化鈉溶液，微熱攪拌直到蛋白質完全溶解為止。將溶解好的蛋白溶液轉移到500毫升容量瓶中，並用少量蒸餾水洗凈燒杯，一並倒入容量瓶。
（3）在容量瓶中再加入1 mol·L-1醋酸溶液50毫升，搖勻。
（4）加入蒸餾水定容至500毫升，得到略現渾濁的，在0.1mol·L-1 NaAC溶液中的酪蛋白膠體。
2．等電點測定
按下表順序在各管中加入蛋白質膠液，並准確地加入蒸餾水和各種濃度的醋酸溶液，加入後立即搖勻。

觀察各管產生的混濁並根據混濁度來判斷酪蛋白的等電點。觀察時可用+，++，+++，表示渾濁度。

⑶ 測量蛋白質等電點的方法有哪些謝謝

等電點：如果調節溶液的PH值使得其中的氨基酸呈電中性，我們把這個PH值稱為氨基酸的等電點：PI。PI是氨基酸的重要常數之一，它的意義在於，物質在PI處的溶解度最小，是分離純化物質的重要手段。
等電點的計算：對於所有的R基團不解離的氨基酸而言（即解離只發生在α-羧基和α-氨基上），計算起來非常簡單：PI＝（PK1』+PK2』）/2若是碰到R基團也解離的，氨基酸就有了多級解離，這個公式就不好用了，比如Lys、Glu、Cys等。aa Cys Asp Glu Lys His ArgPK』α-羧基 1.71 2.69 2.19 2.18 1.82 2.19PK』α-氨基 8.33 9.82 9.67 8.95 9.17 9.04PK』-R-基團 10.78（-SH） 3.86（β-COOH） 4.25（γ- COOH） 10.53（ε-NH2） 6（咪唑基） 12.48（胍基）在這種情況下可以按下面的步驟來計算：
<1> 由PK』值判斷解離順序，總是PK1』< PK2』< PK3』< …，即誰的PK』值小，誰就先解離。
<2> 按照解離順序正確寫出解離方程式：簡式，注意解離基團的正確寫法。<3> 找出呈電中性的物質，其左右PK』值的平均值就是氨基酸的等電點：PI＝（PK左』+PK右』）/2以Lys為例：在黑板上用簡式演示
<3>等電點的測定：等電聚焦法：這是一種特殊的電泳，其載體上鋪有連續的PH梯度的緩沖液，然後將氨基酸點樣，只要該處的PH與氨基酸的PI不同，則氨基酸就會帶電，PH值>PI時，aa帶-電；PH值<PI時，aa帶+電。通電後，氨基酸就會移動，直到某處的PH＝PI，氨基酸才呈電中性，不再移動，因此，可以測出PI。等電點沉澱所有的氨基酸均為兩性物質，亦即它們至少含有一個酸性基（carboxyl）及一個鹼性基（α-amino）。
這些可游離的團基在pH變化時，因釋出或接受質子而可充當弱酸或弱鹼，其離子化特性與其它物質一樣遵守Henderson-Hasselbalch方程式：pH = pKa + log10 [未質子化的形式（鹼）] / [已質子化的形式（酸）]即pH = pKa + log [A-] / [HA] 氨基酸可以三種形式存在，即正電荷（cation）、兩性離子（zwitterion）或雙極性離子（dipolar ion）及負電荷（anion）等三種，若在酸性溶液中帶正電荷，則在鹼性溶液中帶負電荷。若氨基酸在某一pH值下其凈電荷為0，且在電場中不移動時，稱此pH值為它的pI值（等電點）。因為凈電荷為零，凈電斥力不存在的緣故，大部份蛋白質於等電點的pH值下，其溶解度最小。相反的，當溶液的pH值低於或高於pI，所有蛋白質分子所帶凈電荷必為同號，彼此之間有相斥力，不會凝結。所以，將pH調到等電點的大小，則大部份的蛋白質將會沉澱，這種現象可以應用於估算某蛋白質的等電點.

⑷ 蛋白質等電點的測定方法

●方法：平板等電聚焦
●原理：蛋白質分子在含有載體兩性電介質形成的連續而穩定版的線性pH梯度中權進行電泳。但不自是按照等電點不同被分離。
●儀器：Bio-Rad Model 111Mini IEF Cell
●樣品要求：
●液體：濃度>3mg/ml；體積>200ul；固體：質量>200ug
●樣品純度>90%；含鹽量<3 0mM；分子量：一般要求大於1000Da
●常見影響測試情況:
1、蛋白質純度不足
2、含鹽量過高
3、蛋白質分子量太小，導致無法固定染色

⑸ zeta電位儀測等電點和溶液法測的區別

等電點：在某一pH的溶液中，氨基酸解離成陽離子和陰離子的趨勢及程度相等，版所帶凈電荷為零，呈權電中性，此時溶液的pH稱為該氨基酸的等電點。
兩性離子所帶電荷因溶液的pH值不同而改變，當兩性離子正負電荷數值相等時，溶液的pH值即其等電點。
①當外界溶液的pH大於兩性離子的pI值，兩性離子釋放質子帶負電。
②當外界溶液的pH小於兩性離子的pI值，兩性離子質子化帶正電。
③當達到等電點時氨基酸在溶液中的溶解度最小。

⑹ 測定蛋白質等電點的方法的原理是什麼

等電聚焦電泳（IFE,isoelectric focusing electrophoresis）
利用特殊的一種緩沖液（兩性電解質）在凝膠（常用聚丙烯醯胺凝內膠）內製造一容個pH梯度,電泳時每種蛋白質就將遷移到等於其等電點（pI）的pH處（此時此蛋白質不再帶有凈的正或負電荷）,形成一個很窄的區帶.
還有一種是根據蛋白在等電點時的溶解度來測定,配製一系列不同pH的緩沖液,測定蛋白質的溶解度,溶解度最小的pH就是蛋白的pI.

⑺ 等電點的測定方法

你配置水溶液，PH調到10，滴加稀鹽酸，同時測PH和電導率，作圖能求出來

⑻ 還可以用什麼方法測蛋白質的等電點

●方法：平板等電聚焦
●原理：蛋白質分子在含有載體兩性電介質形成的專連續而穩定的線性pH梯度中屬進行電泳。但不自是按照等電點不同被分離。
●儀器：Bio-Rad Model 111Mini IEF Cell
●樣品要求：
●液體：濃度>3mg/ml；體積>200ul；固體：質量>200ug
●樣品純度>90%；含鹽量<3 0mM；分子量：一般要求大於1000Da
●常見影響測試情況:
1、蛋白質純度不足
2、含鹽量過高
3、蛋白質分子量太小，導致無法固定染色

⑼ 蛋白質等電點測定實驗的原理是什麼

蛋白質是兩性電解質，蛋白質在鹼性溶液中成陰離子，在酸性溶液中成陽離子；蛋白質分子所帶凈電荷為零時的pH值稱為蛋白質的等電點（PI）。在等電點時，蛋白質分子在電場中不向任何一極移動，而且分子與分子間因碰撞而引起聚沉的傾向增加，所以這時可以使蛋白質溶液的粘度、滲透壓均減到最低，且溶液變混濁。若再加入一定量的溶劑如乙醇、丙酮，它們與蛋白質分子爭奪水分子，竭力減低蛋白質水化層的厚度而使混濁更加明顯。
各種蛋白質的等電點都不相同，但偏酸性的較多，如牛乳中的酪蛋白的等電點是4.7~4.8，血紅蛋白等電點為6.7~6.8，胰島素是5.3~5.4，魚精蛋白是一個典型的鹼性蛋白，其等電點在pH12.0~12.4。近年來蛋白質的等電點可以採用等電聚焦技術加以准確測定，但需一定的實驗條件。本實驗採用蛋白質在不同pH溶液中形成的混濁度來確定，即混濁度最大時的pH值即為該種蛋白質的等電點值，這個方法雖然不很准確，但在一般實驗條件下都能進行，操作也簡便。