測定蛋白質需要哪些儀器

A. folin酚試劑法測定蛋白質含量所用器材有哪些

儀器有分光光度計 台式離心機 精密天平 三角瓶 燒杯 量筒 移液器
Folin—酚試劑法最早由內Lowry確定了蛋白容質濃度測定的基本步驟。以後在生物化學領域得到廣泛的應用。這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法，由於其試劑乙的配製較為困難（現在已可以訂購），近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。
此法的顯色原理與雙縮脲法是相同的，只是加入了第二種試劑，即Folin—酚試劑，以增加顯色量，從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生深藍色的原因是：在鹼性條件下，蛋白質中的肽鍵與銅結合生成復合物。 Folin—酚試劑中的磷鉬酸鹽—磷鎢酸鹽被蛋白質中的酪氨酸和苯丙氨酸殘基還原，產生深藍色（鉬蘭和鎢蘭的混合物）。在一定的條件下，藍色深度與蛋白的量成正比。

B. 現在國內檢測蛋白質用什麼方法涉及到哪些化學儀器

目前食品中蛋白質的測定方法有蛋白質自動分析儀，近紅外自動測定儀，紫外分光光度法以及凱氏定氮法等。本文採用納氏試劑作為顯色劑測定食品中蛋白質含量，適用范圍廣，可用於各類食品及保健食品的檢測。用本法對標准品、質控樣品進行測定獲得滿意結果，對批量樣品的快速測定更具有實用性。現將結果報告如下。

材料與方法

儀器與試劑 WFZ800-D3型紫外分光光度計(北京第二光學儀器廠)。分析純硫酸、硫酸銅、硫酸鉀。(1)納氏試劑：稱取碘化汞100g及碘化鉀70g，溶於少量無氨蒸餾水中，將此溶液緩緩傾入己冷卻的32%氫氧化鈉溶液500ml中，並不停攪拌，再用蒸餾水稀釋至1L，貯於棕色瓶中，用橡皮塞塞緊，避光保存。(2)硫酸銨標准儲備溶液(1.0g/L)：精確稱取經硫酸乾燥的硫酸銨0.4720g，加水溶解後移入100mL容量瓶中，並稀釋至刻度，混均此液每毫升相當於1.0mgNH3-N(10℃下冰箱內儲存穩定1年以上)。(3)硫酸銨標准使用溶液(0.01g/L)：用移液管精密吸取1.0ml標准儲備液(1.0g/L)於100ml容量瓶內，加水稀釋至刻度，混勻，此溶液每毫升相當於10.0μg NH3-N。

方法

標准曲線繪制 取25ml比色管7支，分別准確吸取0.01g/L硫酸銨標准使用液0.00，0.5，1.0，3.0，5.0，7.0，10.0ml(相當於標准0.0，5.0，10.0，30.0，50.0，70.0，100.0μg)，加水至10ml刻度，於標准系列管中各加2ml納氏試劑，混勻後放置10min，移入1cm比色皿內，以零管為參比，於波長420mm處測量吸光度，以標准管含量為橫坐標(μg),對應的吸光度(A)值為縱坐標繪制標准曲線。

樣品測定 選擇牛奶和奶粉為檢測樣品。精密稱取樣品0.1～2.0g置於250ml三角瓶中，加入0.2gCuSO4、1.0gK2SO4、硫酸10ml，先小火加熱，待內容物全部炭化，泡沫停止後，加大火力至液體呈藍色，使H2SO4剩餘量約為3ml左右為止，室溫放冷後，沿瓶壁慢慢加入10ml水，移入100ml容量瓶中，用少量蒸鎦水洗三角瓶3次，洗液全部並入容量瓶中，冷卻，加蒸餾水至刻度，混勻。測定時取0.5ml，加水至10ml刻度，以後操作同標准曲線。同時做空白試驗。

計算公式

X=c×Fm×V2V1×1000×1000×1000

式中：X-試樣中蛋白質含量(g/100g或g/100ml)

C-試樣測定液中扣除空白後氮的含量(μg)

V1-試樣消化液定容體積(ml)

V2-測定用消化液體積(ml)

m-樣品質量(g)或體積(ml)

F-氮換算為蛋白質的系數。

蛋白質的氮含量一般為15%～17.6%，按16%計算乘以6.25即為蛋白質，乳製品為6.38，麵粉為5.7，肉及肉製品為6.25，大豆為5.71。

結果

2.1 測定波長選擇 含氮量為30μg的標准管在顯色後，在波長400～440mm范圍內每間隔5nm進行測定，最大吸收波長為420mm。

顯色劑用量選擇 含氮量為30μg的標准管分別加入不同量的納氏試劑，在420mm的波長下分別測定其吸光度結果。納氏試劑顯色劑加入量為1.5～3.0ml時吸光度基本無變化，本法選擇加入納氏試劑2.0ml。

顯色時間及穩定性 含氮量為30μg的標准管經顯色後，分別在10，30min，1，2，4，8h進行測定。顯色後10min～8h內吸光度穩定無變化。本法選顯色10min後測定。

標准曲線 回歸方程：y=0.016X-1.5×10-3，r=0.9998，最佳線性范圍0.0～100μg。

精密度 牛乳和奶粉2種樣品分別取6份按本法重復測定6次，牛乳和奶粉精密度測定結果：平均數分別為3.06，23.50；標准差分別為±0.029，±0.073；相對標准偏差分別為0.31%，0.94%。

對2種樣品利用標准加入法作回收試驗(表1) 結果可見，回收率為95.50%～99.44%。

2種方法測定結果比較 分別用GB/T5009.5-2003凱氏定氮法與本法測定。結果顯示，2種分析方法的測定結果差異無統計學意義(t=0.026，P>0.05)。

測定標准物質 用本法測定4種不同的蛋白質標准物質，測定結果與標准物質含量一致。

以納氏試劑作為顯色劑快速測定食品中蛋白質的方法特點簡單、快速，適用於批量樣品測定。在鹼性條件下NH3-N與納氏試劑反應生成的黃色化合物穩定。本法與國標凱氏定氮法進行比較t=0.026,P<0.05，n=32，2種方法測定結果無明顯差異。測定范圍廣，線性范圍寬0.0～100.0μg；精密度高；相對標准偏差為0.31%～0.94%；回收率好，加標回標率為95.50%～99.44%。用本法測定標准物質結果一致，用於質量控制樣本測定結果滿意。本法儀器試劑簡單，易於基層普及，有利於推廣應用。

C. 檢測蛋白質結構的儀器分析方法有哪些

測結構用核磁，同分異構都給你分辨出來。其次就是液質了，首選LC-TOF

D. 考馬斯亮藍法測蛋白質含量用到哪些儀器

蛋白質的存在影響酸鹼滴定中所用某些指示劑的顏色變化，從而改變這些染料的專光吸收。在些基礎上發展了蛋屬白質染色測定方法。涉及的指示劑有甲基橙、考馬斯亮藍、溴甲酚綠和溴甲酚紫。目前廣泛使用的染料是考馬斯亮藍。
考馬斯亮藍G-250在酸性溶液中為棕紅色，當它與蛋白質通過范德華鍵結合後，變為藍色，且在蛋白質一定濃度范圍內符合比爾定律，可在595nm處比色測定。2—5分鍾即呈最大光吸收，至少穩定1小時。在0.01—1.0 mg蛋白質/ml范圍內均可。該法操作簡便迅速，消耗樣品量少，但不同蛋白質之間差異大，且標准曲線線性差。高濃度的Tris、EDTA、尿素、甘油、蔗糖、丙酮、硫酸銨和去污劑時測定有干擾。緩沖液濃度過高時，改變測定液pH值會影響顯色。考馬斯亮藍染色能力強，比色杯不洗干凈會影響光吸收值，不可用石英懷測定

E. 測定蛋白質的構型和功能要用什麼儀器，有哪些步驟

你好，很高興回答你的問題。

構型這個概念是指 一個有機分子中各個原子特有的固定的空間排列。這種排列不經過共價鍵的斷裂和重新形成是不會改變的。構型的改變往往使分子的光學活性發生變化。蛋白質的構型就是一級結構，指其氨基酸排列順序。

測定蛋白質的構型的主要有兩種方法：Edman降解（Edman degradation）和質譜法。

EDMAN降解法測序是經典的方法，通過從多肽鏈游離的N末端（或者C末端，但是很少）測定氨基酸殘基的序列的過程。N末端氨基酸殘基被苯異硫氰酸酯修飾，然後從多肽鏈上切下修飾的殘基，現在一般都是自動測序儀。

質譜法測蛋白只要是利用生物質譜儀，比如ESI-Q-TOF，ESI-IT-Obitraq。利用特異的酶將蛋白切成肽段， 然後通過質譜方法進行測定，產生數據或通過重頭比對，或者通過生物信息學中資料庫搜索的方法推斷出肽段序列，然後再由肽段序列拼接處蛋白序列。這種方法是近些年來隨著蛋白質組學的發展而廣泛被使用，但是對於蛋白完整序列測定需要較強的生物信息學技術。

整體而言， EDMAN降解法准確， 但是耗時長， 而且對於所測定的肽段要求很高， 不能太長， 不能太難修飾等等， 一般能測個20-50鹼基不錯了。而質譜法方法快速，但是准確性比EDMAN降解法略差。

另外，樓主講的蛋白功能測定，不同的蛋白質功能各異，蛋白功能主要通過生物學實驗反復驗證次得到，這個比較復雜，沒有固定的模式，要逐一研究。

另外，像核磁儀可以用來研究蛋白的構象或者說晶體結構，表面等離子共振儀器可以用來研究蛋白蛋白相互作用，等等，蛋白質是未來有限的生物研究資源，現在全世界對蛋白質的研究熱情都很高。也有許多相關的基礎科教書，樓主感興趣可以去看看。

純手工打造，希望採納哦。

F. 測量蛋白質氮含量的常用儀器

食品中蛋白質含量測定（凱氏定氮法）
（5009．5-2003食品中蛋白質含量測定）
一、目的與要求
1、學習凱氏定氮法測定蛋白質的原理。
2、掌握凱氏定氮法的操作技術，包括樣品的消化處理、蒸餾、滴定及蛋白質含量計算等。
二、實驗原理
蛋白質是含氮的化合物。食品與濃硫酸和催化劑共同加熱消化，使蛋白質分解，產生的氨與硫酸結合生成硫酸銨，留在消化液中，然後加鹼蒸餾使氨游離，用硼酸吸收後，再用鹽酸標准溶液滴定，根據酸的消耗量來乘以蛋白質換算系數，即得蛋白質含量。
因為食品中除蛋白質外，還含有其它含氮物質，所以此蛋白質稱為粗蛋白。
三、儀器與試劑
（一）試劑
1、硫酸銅（CuSO4•5H20）
2、硫酸鉀
3、硫酸（密度為1.8419g/L）
4、硼酸溶液（20g/L）
5、氫氧化鈉溶液（400g/L）
6、0.01mol/L鹽酸標准滴定溶液。
7、混合指示試劑：0.1%甲基紅乙溶液液1份，與0.1%溴甲酚綠乙醇溶液5份臨用時混合。
8、黃豆粉。
（二）儀器
微量定氮蒸餾裝置：如圖3- 所示。

圖3- 微量凱氏定氮裝置
1、電爐； 2、水蒸氣發生器（2L平底燒瓶）；3、螺旋夾a；
4、小漏斗及棒狀玻璃塞（樣品入口處）；5、反應室；6、反應室外層；
7、橡皮管及螺旋夾b；8、冷凝管；9、蒸餾液接收瓶。
四、實驗步驟
1、樣品消化
稱取黃豆粉約0.3g（±0.001g），移入乾燥的100mL凱氏燒瓶中，加入0.2g硫酸銅和6g硫酸鉀，稍搖勻後瓶口放一小漏斗，加入20mL濃硫酸，將瓶以450角斜支於有小孔的石棉網上，使用萬用電爐，在通風櫥中加熱消化，開始時用低溫加熱，待內容物全部炭化，泡沫停止後，再升高溫度保持微沸，消化至液體呈藍綠色澄清透明後，繼續加熱0.5h，取下放冷，小心加20mL水，放冷後，無損地轉移到100mL容量瓶中，加水定容至刻度，混勻備用，即為消化液。
試劑空白實驗：取與樣品消化相同的硫酸銅、硫酸鉀、濃硫酸，按以上同樣方法進行消化，冷卻，加水定容至100mL，得試劑空白消化液。
2、定氮裝置的檢查與洗滌
檢查微量定氮裝置是否裝好。在蒸氣發生瓶內裝水約三分之二，加甲基紅指示劑數滴及數毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入數粒玻璃珠（或沸石）以防止暴沸。
測定前定氮裝置如下法洗滌2~3次：從樣品進口入加水適量（約占反應管三分之一體積）通入蒸汽煮沸，產生的蒸汽沖洗冷凝管，數分鍾後關閉夾子a，使反應管中的廢液倒吸流到反應室外層，打開夾子b由橡皮管排出，如此數次，即可使用。
3、鹼化蒸餾
量取硼酸試劑20mL於三角瓶中，加入混合指示劑2~3滴，並使冷凝管的下端插入硼酸液面下，在螺旋夾a關閉，螺旋夾b開啟的狀態下，准確吸取10.0mL樣品消化液，由小漏斗流入反應室，並以10mL蒸餾水洗滌進樣口流入反應室，棒狀玻塞塞緊。使10mL氫氧化鈉溶液倒入小玻杯，提起玻塞使其緩緩流入反應室，用少量水沖洗立即將玻塞蓋堅，並加水於小玻杯以防漏氣，開啟螺旋夾a，關閉螺旋夾b，開始蒸餾。通入蒸汽蒸騰10min後，移動接收瓶，液面離開凝管下端，再蒸餾2min。然後用少量水沖洗冷凝管下端外部，取下三角瓶，准備滴定。
同時吸取10.0mL試劑空白消化液按上法蒸餾操作。
4、樣品滴定
以0.01mol/L鹽酸標准溶液滴定至灰色為終點。
5、數據記錄
項 目 第一次 第二次 第三次
樣品消化液（mL）
滴定消耗鹽酸標准溶液（mL）
消耗鹽酸標准溶液平均值（mL）
五、結果計算

式中 X——樣品蛋白質含量（g/100g）；
V1——樣品滴定消耗鹽酸標准溶液體積（mL）；
V2——空白滴定消耗鹽酸標准溶液體積（mL）；
c——鹽酸標准滴定溶液濃度（mol/L）；
0.0140 ——1.0mL鹽酸 標准滴定溶液相當的氮的質量（g）；
m——樣品的質量（g）；
F——氮換算為蛋白質的系數，一般食物為6.25；乳製品為6.38；麵粉為5.70；
高梁為6.24；花生為5.46；米為5.95；大豆及其製品為5.71；肉與肉製品為
6.25；大麥、小米、燕麥、裸麥為5.83；芝麻、向日葵5.30。
計算結果保留三位有效數字。
六、注意事項及說明
1、本法也適用於半固體試樣以及液體樣品檢測。半固體試樣一般取樣范圍為2.00g~5.00g；液體樣品取樣10.0mL~25.0mL（約相當氮30mg~40mg）。若檢測液體樣品，結果以g/100mL表示。
2、消化時，若樣品含糖高或含脂及較多時，注意控制加熱溫度，以免大量泡沫噴出凱氏燒瓶，造成樣品損失。可加入少量辛醇或液體石蠟，或硅消泡劑減少泡沫產生。
3、消化時應注意旋轉凱氏燒瓶，將附在瓶壁上的碳粒沖下，對樣品徹底消化。若樣品不易消化至澄清透明，可將凱氏燒瓶中溶液冷卻，加入數滴過氧化氫後，再繼續加熱消化至完全。
4、硼酸吸收液的溫度不應超過40℃，否則氨吸收減弱，造成檢測結果偏低。可把接收瓶置於冷水浴中。
5、在重復性條件下獲得兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%
七、思考題
1、預習凱氏定氮法測定蛋白質的原理及操作。
2、蒸餾時為什麼要加入氫氧化鈉溶液？加入量對測定結果有何影響？
3、在蒸汽發生瓶水中、加甲基紅指示劑數滴及數毫升硫酸的作用是什麼？若在蒸餾過程中才發現蒸汽發生瓶中的水變為黃色，馬上補加硫酸行嗎？
4、實驗操作過程中，影響測定準確性的因素有哪些？

G. 請問我要做SDS測定蛋白質分子質量 都需要什麼設備儀器和葯品

電泳儀、還有N多聚丙烯醯胺膠的葯品、一個搖床、大培養皿、考馬斯亮藍、牛血清白蛋白標准品等等，太多了。你不會從零准備吧？

H. 水果中蛋白質含量的檢測用什麼方法或儀器

食品中蛋白質含量的測定
院系：機械工程學院；專業：食品科學與工程；年級10級；班級：一班；姓名：姜海洋；學號：201044035
摘要
隨著食品工業的快速發展，人們對食品中營養元素的要求越來越嚴格。蛋白質是人體生命的物質基礎，是人體重要的營養元素,測定蛋白質的含量有利評價食品的營養價值，合理開發利用食品資源。同時對提高產品質量，優化食品配方有重要意義。
關鍵字：食品 蛋白質 含量 測定
前言
化學分析是一門以實驗動手為基礎的理論課程。其主要以化學分析為基礎，根據物質分子的一些理化特徵：酸鹼特性，氧化還原特性等用一些化學試劑、儀器設備等對一些物質成分進行定性定量的分析。當代的化學分析其主要應用於食品行業。通過一些理化特性對食品中的營養素、添加劑、有害物質進行測定，對現在食品的檢測、研發等具有重要意義。
蛋白質的組成：
蛋白質是復雜的含氮有機化合物，分子質量很大，主要化學元素為C、H、O、N，在莫些蛋白質中還含有P、S、Cu、Fe、Ⅰ等元素。這些元素在蛋白質中的含量如下表：
元素種類
C
H
O
N
S
該元素含量%
50-60
6-7
20-23
15-17
0.3-2.5
從表中可以看出，蛋白質的平均含氮量為16%，這也是蛋白質元素組成的一個特點，也是凱氏（kjedahl）定氮法測定蛋白質含量的一個計算基礎：
蛋白質含量（%）=蛋白質含氮量（%）*6.25
式中6.25即16%的倒數為1g氮含量。由於食物中另外兩種重要的營養元素——碳水化合物、脂肪中含有C、H、O，不含N，所以含氮是區別於其他有機物的主要標志。
蛋白質在人體中的重要性及其測定意義：
蛋白質是生命存在的物質基礎，是構成生物體細胞組織的重要成分，一切有生命的活體均含有不同類型的蛋白質。蛋白質又是食品的重要組成成分之一，也是食品中重要營養元素指標。蛋白質主要為人體提供必需的氨基酸，在構成蛋白質的20中主要氨基酸中亮氨酸、異亮氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、色氨酸和纈氨酸8中氨基酸在人體中不能合成，必須依靠食品提供，在正常情況下，視頻提供的總熱量中蛋白質提供11%--13%。部分蛋白質是生物催化劑如：酶和激素，以控制機體的生長、消化、代謝、分泌和能量轉意等變化，蛋白質還是人體免疫作用所必需的物質，可以形成抗體以預防疾病的感染。因此，蛋白質是人體重要的營養物質也是食品中重要的營養成分，此外，在食品加工過程中，蛋白質及其分解產物對食品色、香、味和產品質量都有一定的影響，。測定食品中蛋白質的含量，對於評價食品的營養價值，合理開發利用食品資源，提高食品加工質量，優化食品配方，核算經濟成本和控制生產過程均具有重要意義。
蛋白質測定的方法：
測定蛋白質的方法可分為兩類：一類是利用蛋白質的共性即含氮量、肽鍵和折射率等測定蛋白質含量，另一類是利用蛋白質種特定氨基酸殘基、酸性和鹼性基團以及芳香基團等測定蛋白質的含量。蛋白質測定最常用的方法是凱氏定氮法，它是測定總有機氮的最常用和操作較簡便的方法之一，在國內外普遍使用。此外，雙縮脲分光光度法，燃料結合分光光度法，酚試劑法等也常用於蛋白質含量測定，由於方法簡便快捷，多用於生產單位質量控制分析。這種檢測的方法誤差小，而且操作簡單，是非常值得提倡的，我們可以根據檢測的結果能看出來我們更應該吃什麼樣的水果了。

I. western blot實驗都需要哪些儀器

試劑：tris、Hcl、Nacl、脫脂牛奶、甲醇、甘氨酸、tween
20、抗、二抗、顯色劑及SDS
PAGE需要版試劑（tris、Hcl、TEMED、SDS、硫酸銨、丙烯醯胺、N
N
甲叉雙丙權烯醯胺、甘氨酸、非預染蛋白Marker、甲醇、乙酸、考馬斯亮藍R250）、預染蛋白Marker
耗材：濾紙、膜、乳膠手套等
儀器：電泳儀、電轉槽、搖床、冰浴等

J. 蛋白質柱純化過程中用的主要儀器有哪些

柱純化是蛋白純來化最高效源的方法.
首先我們需要一個帶有特定標簽的柱子,也可能是陰離子柱,陽離子柱或者層析柱.
然後要一台純化儀,我們實驗室的是bio-red,其實最好的純化儀是AKTA的,很耐折騰,bio-red的太敏感,大量純化是容易出問題.
其他的儀器就是純化後工作,比如純化好的蛋白保存,可能會用到冷凍乾燥.
對了,還有一個,就是SDS-PAGE蛋白電泳儀,用來檢測蛋白是否表達,是否完全破碎,純化後是否有雜蛋白等等.
其他的就沒有了.