微生物檢測儀器包括哪些
1. 微生物細菌總數測定會用到的所有儀器有什麼
一、菌落總數介紹:
菌落是指細菌在固體培養基上生長繁殖而形成的能被肉眼識別的生長物,它是由數以萬計相同的細菌集合而成。當樣品被稀釋到一定程度,與培養基混合,在一定培養條件下,每個能夠生長繁殖的細菌細胞都可以在平板上形成一個可見的菌落。
菌落總數就是指在一定條件下(如需氧情況、營養條件、pH、培養溫度和時間等)每克(每毫升)檢樣所生長出來的細菌菌落總數。按國家標准方法規定,即在需氧情況下,37℃培養48h,能在普通營養瓊脂平板上生長的細菌菌落總數,所以厭氧或微需氧菌、有特殊營養要求的以及非嗜中溫的細菌,由於現有條件不能滿足其生理需求,故難以繁殖生長。因此菌落總數並不表示實際中的所有細菌總數,菌落總數並不能區分其中細菌的種類,所以有時被稱為雜菌數,需氧菌數等。
菌落總數測定是用來判定食品被細菌污染的程度及衛生質量,它反映食品在生產過程中是否符合衛生要求,以便對被檢樣品做出適當的衛生學評價。菌落總數的多少在一定程度上標志著食品衛生質量的優劣。
二、檢驗方法
菌落總數的測定,一般將被檢樣品製成幾個不同的10倍遞增稀釋液,然後從每個稀釋液中分別取出1mL置於滅菌平皿中與營養瓊脂培養基混合,在一定溫度下,培養一定時間後(一般為48小時),記錄每個平皿中形成的菌落數量,依據稀釋倍數,計算出每克(或每ml)原始樣品中所含細菌菌落總數。
基本操作一般包括:樣品的稀釋--傾注平皿--培養48小時--計數報告。
國內外菌落總數測定方法基本一致,從檢樣處理、稀釋、傾注平皿到計數報告無何明顯不同,只是在某些具體要求方面稍有差別,如有的國家在樣品稀釋和傾注培養進,對吸管內液體的流速,稀釋液的振盪幅度、時間和次數以及放置時間等均作了比較具體的規定。
檢驗方法參見:
GB4789.2-94 《中華人民共和國國家標准 食品衛生微生物學檢驗 菌落總數測定》
SN0168-92 《中華人民共和國進出口商品檢驗行業標准 出口食品菌落計數》
三、說明
(一)樣品的處理和稀釋:
1.操作方法:以無菌操作取檢樣25g(或25ml),放於225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(瓶內預置適當數量的玻璃珠)或滅菌乳缽內,經充分振要或研磨製成1:10的均勻稀釋液。
固體檢樣在加入稀釋液後,最好置滅菌均質器中以8000~10000r/min的速度處理1min,製成1:10的均勻稀釋液。
用1ml滅菌吸管吸取1:10稀釋液1ml,沿管壁徐徐注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內,振搖試管混合均勻,製成1:100的稀釋液。
另取1ml滅菌吸管,按上項操作順序,制10倍遞增稀釋液,如此每遞增稀釋一次即換用1支1ml滅菌吸管。
2.無菌操作:操作中必須有「無菌操作」的概念,所用玻璃器皿必須是完全滅菌的,不得殘留有細菌或抑菌物質。所用剪刀、鑷子等器具也必須進行消毒處理。樣品如果有包裝,應用75%乙醇在包裝開口處擦拭後取樣。
操作應當在超凈工作台或經過消毒處理的無菌室進行。瓊脂平板在工作台暴露15分鍾,每個平板不得超過15個菌落。
3.采樣的代表性:如系固體樣品,取樣時不應集中一點,宜多采幾個部位。固體樣品必須經過均質或研磨,液體樣品須經過振搖,以獲得均勻稀釋液。
4.樣品稀釋誤差:為減少樣品稀釋誤差,在連續遞次稀釋時,每一稀釋液應充分振搖,使其均勻,同時每一稀釋度應更換一支吸管。
在進行連續稀釋時,應將吸管內液體沿管壁流入,勿使吸管尖端伸入稀釋液內,以免吸管外部粘附的檢液溶於其內。
為減少稀釋誤差,SN標准採用取10mL稀釋液,注入90mL緩沖液中。
5.稀釋液:樣品稀釋液主要是滅菌生理鹽水,有的採用磷酸鹽緩沖液(或0.1%蛋白腖水),後者對食品已受損傷的細菌細胞有一定的保護作用。如對含鹽量較高的食品(如醬油)進行稀釋,可以採用滅菌蒸餾水。
(二)傾注培養
1.操作方法:根據標准要求或對污染情況的估計,選擇2~3個適宜稀釋度,分別在制10倍遞增稀釋的同時,以吸取該稀釋度的吸管移取1ml稀釋液於滅菌平皿中,每個稀釋度做兩個平皿。
將涼至46℃營養瓊脂培養基注入平皿約15ml,並轉動平皿,混合均勻。同時將營養瓊脂培養基傾入加有1ml稀釋液(不含樣品)的滅菌平皿內作空白對照。
待瓊脂凝固後,翻轉平板,置36±1℃溫箱內培養48±2h,取出計算平板內菌落數目,乘以稀釋倍數,即得每克(每毫升)樣品所含菌落總數。
2.傾注用培養基應在46℃水浴內保溫,溫度過高會影響細菌生長,過低瓊脂易於凝因而不能與菌液充分混勻。如無水浴,應以皮膚感受較熱而不燙為宜。
傾注培養基的量規定不一,從12~20ml不等,一般以15ml較為適宜,平板過厚可影響觀察,太薄又易於乾裂。傾注時,培基底部如有沉澱物,應將底部棄去,以免與菌落混淆而影響計數觀察。
3.為使菌落能在平板上均勻分布,檢液加入平皿後,應盡快傾注培養基並旋轉混勻,可正反兩個方向旋轉,檢樣從開始稀釋到傾注最後一個平皿所用時間不宜超過20min,以防止細菌有所死亡或繁殖。。
4.培養溫度一般為37℃(水產品的培養溫度,由於其生活環境水溫較低,故多採用30℃)。培養時間一般為48h,有些方法只要求24h的培養即可計數。培養箱應保持一定的濕度,瓊脂平板培養48h後,培養基失重不應超過15%。
5.為了避免食品中的微小顆粒或培基中的雜質與細菌菌落發生混淆,不易分辨,可同時作一稀釋液與瓊脂培基混合的平板,不經培養,而於4℃環境中放置,以便計數時作對照觀察。
在某些場合,為了防止食品顆粒與菌落混淆不清,可在營養瓊脂中加入氯化三苯四氮唑(TTC),培養後菌落呈紅色,易於分別。
(三)計數和報告
1.操作方法:培養到時間後,計數每個平板上的菌落數。可用肉眼觀察,必要時用放大鏡檢查,以防遺漏。在記下各平板的菌落總數後,求出同稀釋度的各平板平均菌落數,計算處原始樣品中每克(或每ml)中的菌落數,進行報告。
2.到達規定培養時間,應立即計數。如果不能立即計數,應將平板放置於0-4℃,但不得超過24h。
3.計數時應選取菌落數在30~300之間的平板(SN標准要求為25~250個菌落),若有二個稀釋度均在30~300之間時,按國家標准方法要求應以二者比值決定,比值小於或等於2取平均數,比值大於2則其較小數字(有的規定不考慮其比值大小,均以平均數報告)。
4.若所有稀釋度均不在計數區間。如均大於300,則取最高稀釋度的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。如均小於30,則以最低稀釋度的平均菌落數乘稀釋倍數報告之。如菌落數有的大於300,有的又小於30,但均不在30~300之間,則應以最接近300或30的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。如所有稀釋度均無菌落生長,則應按小於1乘以最低稀釋倍數報告之。有的規定對上述幾種情況計算出的菌落數按估算值報告。
5.不同稀釋度的菌落數應與稀釋倍數成反比(同一稀釋度的二個平板的菌落數應基本接近),即稀釋倍數愈高菌落數愈少,稀釋倍數愈低菌落數愈多。如出現逆反現象,則應視為檢驗中的差錯(有的食品有時可能出現逆反現象,如酸性飲料等),不應作為檢樣計數報告的依據。
6.當平板上有鏈狀菌落生長時,如呈鏈狀生長的菌落之間無任何明顯界限,則應作為一個菌落計,如存在有幾條不同來源的鏈,則每條鏈均應按一個菌落計算,不要把鏈上生長的每一個菌落分開計數。如有片狀菌落生長,該平板一般不宜採用,如片狀菌落不到平板一半,而另一半又分布均勻,則可以半個平板的菌落數乘2代表全平板的菌落數。
7.當計數平板內的菌落數過多(即所有稀釋度均大於300時),但分布很均勻,可取平板的一半或1/4計數。再乘以相應稀釋倍數作為該平板的菌落數。
8.菌落數的報告,按國家標准方法規定菌落數在1~100時,按實有數字報告,如大於100時,則報告前面兩位有效數字,第三位數按四捨五入計算。固體檢樣以克(g)為單位報告,液體檢樣以毫升(ml)為單位報告,表面塗擦則以平方厘米(cm2)報告。
2. 微生物快速檢測儀器的介紹
RVLM微生物快速檢測儀是為客戶在微生物檢測方面的需要和需求提供創新的解決方案·整套版RVLM微生物快權速檢測系統包含了檢測儀器及電腦軟體和專配的檢測瓶·該產品得到美國EPA、美國軍方、加拿大政府和貝爾實驗室等權威機構的認可和廣泛應用
3. 微生物實驗室需要哪些常用的儀器
微生物實驗室主要用於無菌環境下微生物提純、分離、增殖及鑒定等工作,對無菌環境的要求很高。那麼微生物實驗室中則需要用到以下儀器設備。
一、無菌室
無菌室是實驗室的核心部分,主要為樣品提供保護,保證實驗結果的准確和人員的安全。
二、超凈工作台
微生物的培養都是在特定培養基中進行無菌培養,那麼無菌培養必然需要超凈工作台提供一個無菌的工作環境。超凈工作台的主要用途是微生物的接種及處理時的無菌操作。
三、高壓蒸汽滅菌鍋
高壓蒸汽滅菌鍋是一個密閉的、可以耐受一定壓力的雙層金屬鍋。一般在進行無菌操作前需要將操作器皿、培養基等在高壓滅菌鍋里進行滅絕後才能使用。
四、培養箱
培養箱主要用於實驗室微生物的培養,為微生物的生長提供一個適宜的環境。培養箱有以下幾種:
1、普通培養箱
2、生化培養箱
3、恆溫恆濕箱
4、厭氧培養箱
五、天平
天平是用於精確稱量各類試劑及葯品的設備。實驗室常用的是電子天平。
六、微波爐/電爐
其主要作用是用於溶液的快速加熱,微生物固體培養基的加熱溶化等。
七、搖床
搖床又稱搖瓶機,它是培養好氣性微生物的小型試驗設備或作為種子擴大培養之用。
八、冰箱
冰箱是實驗室中保存試劑和樣品必不可少的儀器。微生物學實驗中用到的試劑有些要求是4度保存,有些要求是負20度保存,實驗人員一定要看清試劑的保存條件,放置在恰當的溫度下保存。
九、顯微鏡
微生物個體微小,必須藉助顯微鏡才能觀察清楚它們的個體形態和細胞結構。因此,在微生物學的各項研究中,顯微鏡就成為不可缺少的工具。
十、生物安全櫃
微生物實驗中所涉及到的部分試劑和樣品微生物有些是有毒的,對於操作人員來說傷害比較大。為了防止有害德懸
十一、菌落計數器
菌落計數儀可幫助操作者計數菌落數量。通過放大,拍照,計數等方式來准確的獲取菌落的數量。有些高性能的菌落計數器還可直接連接電腦來完成自動計數的操作,方便快捷的計數。
十二、分光光度計
分光光度計在微生物試驗中用於測定微生物懸液的濃度,可以正確選取合適的培養時間。
十三、離心機
離心機是用於收集微生物菌體以及其他沉澱物。有冷凍離心機和常溫離心機之分。
十四、液氮罐
液氮罐里裝有液氮,可用於微生物實驗室中各菌種的長期保存。
4. 測微生物的一般都有什麼儀器設備,有什麼快速檢測設備,價格一般都是多少
光學顯微鏡和電子顯微鏡
傳統的培養基法、膠體金、酶免法和PCR 法
5. 微生物實驗的基本儀器有哪些
玻璃儀器:
三角瓶,玻璃棒,試管,塗布器,接種環,載玻片,蓋玻片,酒精燈,回平答板
設備:
微波爐,水浴鍋,滅菌鍋,乾燥箱,超凈工作台,電熱培養箱(細菌),生化培養箱(真菌),顯微鏡(配套購買松柏油,擦鏡紙)
培養基:
各種基礎營養(牛肉膏、蛋白腖等),各種有機無機鹽
6. 食品微生物的主要檢測指標有哪些實驗室必備的儀器有哪些急需,謝謝
菌落抄總數
大腸菌群
致病菌
沙門氏菌
黴菌
致瀉大腸埃希氏菌
單核細胞增生李斯特氏菌
必備的出廠檢驗設備
(一)分析天平(0.1mg);(二)天平(0.1g);(三)乾燥箱;(四)微生物培養箱;(五)無菌室或超凈工作台;(六)滅菌鍋;(七)生物顯微鏡。
7. 請教各位,食品微生物檢測所需儀器有哪些
主要看你想要檢測什麼,種類,數量等等?
一般的話也有很多的。比如:棉簽,消過毒的試管,蛋白腖水,培養皿,顯微鏡,培養箱,各種營養基和化學試劑,火焰燈,滅菌鍋,超凈工作台等等等等,太多了啊。。。主要看你想要干什麼
8. 微生物快速檢測儀器的檢測儀器
RVLM微生物快速檢測儀是為客戶在微生物檢測方面的需要和需求提供創新的解決方案.整套RVLM微生物快速檢測系統包含了檢測儀器及電腦軟體和專配的檢測瓶.該產品得到美國EPA、美國軍方、加拿大政府和貝爾實驗室等權威機構的認可和廣泛應用
主要特點:
1)可檢測固態、液態、表面、膏狀、漿狀樣本;
2)樣本在檢測時無需任何的前處理過程,直接丟入搖搖瓶即可;
3)檢測樣本只需1ml/1g;同一溫度下可同時檢測8個樣品;
4)靈敏度高達可檢測到1目標微生物;特異性高達99.999%;
5)簡單三個操作步驟,傻瓜型,無需專業操作人員;
6)儀器攜帶型,可直接連接電腦出定量分析檢測報告,並可隨時隨地進行檢測、100%定量分析。
7)檢測瓶使用後安全丟棄-和過期葯物同樣處理。
檢測原理及方法:
集傳統檢驗方法優點於一身:-培養皿法-酶法(β-葡萄糖苷酸酶分析)-免疫法(抗原搜尋)-基因法(基因搜尋)
檢測范圍:
活細菌總數
大腸菌群/大腸桿菌/大腸桿菌O157, O111, O104...等
腸道桿菌科
金黃色葡萄球菌
銅綠假單胞菌;綠膿桿菌
沙門氏菌
李斯特菌
腸球菌
麴黴屬真菌;麴黴菌屬
酵母菌
應用范圍:衛生控制: -食品(HACCP) -廚房、工具、表面(HACCP) -水質 -(CDC)疾病控制、進出口檢驗檢疫 -葯品及化妝品 與我們的生活息息相關,例如: 咖啡館、餐廳 水源檢測、制水廠 分析實驗室和HACCP診斷 農產品及相關加工公司 葯廠、葯房、化妝品廠 環境監測機構 水配送公司 消費者保護團體、工商管理機構 室內空調調節公司
9. 微生物實驗室常用儀器設備清單
從實驗復室工作流程來看,微生物制實驗室可分為樣品保存、樣品前處理、過程分析、清洗滅菌四個流程,不同的工作流程需要不同的儀器。
一、樣品保存
1、 超低溫冰箱:低溫保存疫苗、菌種、生物樣本等
2、 液氮罐:長期活性保存疫苗、菌毒種、細胞
3、 葯品冷藏箱:用於冷藏保存葯品、試劑、生物製品和疫苗
二、樣品前處理
1、 移液器:定量轉移液體的器具
2、 離心機: 液固或液液顆粒分離
3、 凍干機: 凍結的水分子直接升華水蒸氣
4、 均質儀: 提取樣品中DNA/RNA/蛋白質
5、 培養箱: 培養微生物、植物和動物細胞
6、 生物安全櫃: 實驗操作中空氣凈化負壓安全裝置
7、 超凈工作台: 局部工作區域潔凈度
三、過程分析
1、 PCR儀:用於傳染病的診斷、基因復制以及親子鑒定
2、 酶標儀:酶聯免疫吸附試驗的專用儀器
3、 核酸提取儀:核酸提取試劑自動完成樣本核酸提取
4、 暗箱式紫外分析儀:於核酸、蛋白電泳凝膠,薄層層板結果的觀察分析
5、 電泳儀:用於DNA 測序
四、清洗滅菌
1、 高壓滅菌鍋:實驗前後殺菌
2、 超聲波清洗機:清洗實驗器具及玻璃器皿
10. 檢驗食品中微生物需要哪些儀器設備請具體說明下,
微生物實驗室常自用儀器
1.無菌室和超凈工作台
2.培養箱:生化培養箱、普通培養箱、恆溫培養箱、厭氧培養箱
3.恆溫乾燥箱
4.高壓蒸汽滅菌器
5.天平:電子天平(精確度為千分之一或萬分之一)或分析天平
6.顯微鏡:
7.分光光度計(測定菌體生長量)
8.酸度計
9.恆溫水浴鍋
10.冰箱:普通冰箱、低溫冰箱
11.離心機
12.均質器
13.振盪培養搖床
14.厭氧培養設備
15.水凈化設備
16.通風設備
17.電爐或微波爐
18.磁力攪拌器
19.血球計數板、目鏡測微尺、鏡台測微尺、手掀計數器
20.菌落計數器
21.常用的玻璃儀器:(各種型號)試管、培養皿、三角瓶、試劑瓶、移液管、膠頭滴管、載玻片、蓋玻片、漏斗、燒杯、量筒、鑷子、接種環、酒精燈、玻璃棒等
22.常用葯品:(註:根據實驗所需)
23.多媒體教學設備