超聲提取多糖使用什麼儀器
Ⅰ 用超聲法提取多糖的方法
首先要有超聲波儀
以提取香菇中的多糖為例
取香菇100克,粉碎成10-20目大小,放入1000ml的錐形瓶中,加水500ml,水的量最好溢過香菇表面2厘米左右,放入超聲波儀中,提取30分鍾,過濾,重復一次,合並濾液
Ⅱ 超聲波法提取多糖的實驗步驟
摘要:對超聲波輔助熱水提取法從麥冬中提取多糖的工藝進行了研究,旨在更大層次上提取麥冬超聲波法提取多糖的實驗步驟中多糖,首先通過單因素實驗分析了幾個主要因素:液料比,提取時間,提取溫度,超聲波時間對提取率的影響。在單因素的基礎上,通過正交實驗對復合法提取麥冬多糖的工藝研究條件進行了優化,實驗表明,最佳提取工藝條件為:料液比1:20,提取時間15min,提取溫度80,超聲波時間15min,對於麥冬多糖的降血糖的研究表明,麥冬多糖對正常的小鼠有降低血糖的作用。 關鍵詞:麥冬多糖 提取率 單因素 正交實驗 蒽酮-硫酸比色法 降血糖
Ⅲ 超聲波提取需要什麼玻璃儀器
超聲波跟玻璃儀器沒有什麼關系吧?
Ⅳ 超聲波提取多糖中超聲波的作用是什麼
應該是起凝聚的作用吧。
Ⅳ 我可以使用超聲波細胞粉碎機提取靈芝多糖嘛
覽文檔 文檔專題 我的文檔 我要上傳
Ⅵ 實驗室超聲波主要用在什麼儀器
超聲波清洗機抄具備超聲波清洗應用的工況外,主要針對用於實驗室、生物化學、微生物學、葯理學、物理學、動物學、農學、食品、制葯等行業專用器具的清洗以及分析對象的樣品前處理、破碎、乳化、分散、助溶、提取萃取、消泡脫氣、加速化學反應、納米制備等,同時適合高精密零件的高潔凈度清洗工況應用。
Ⅶ 檢測黃酮、粗多糖含量需要哪些儀器
分光光度計、光學讀數分析天平
Ⅷ 實驗室多糖的提取方法請問有幾種和具體步驟求各位老師指點一下
多糖的廣義分類分為: 均一性多糖和不均一性多糖。
均一性多糖:
由一種單糖分子縮合而成的多糖,叫做均一性多糖。自然界中最豐富的均一性多糖是澱粉和糖原、纖維素。它們都是由葡萄糖組成。澱粉和糖原分別是植物和動物中葡萄糖的貯存形式,纖維素是植物細胞主要的結構組分。
1、 澱粉 澱粉是植物營養物質的一種貯存形式,也是植物性食物中重要的營養成分,分為直鏈澱粉和支鏈澱粉。① 直鏈澱粉:許多α-葡萄糖以α(1-4)糖苷鍵依次相連成長而不分開的葡萄糖多聚物。典型情況下由數千個葡萄糖線基組成,分子量從150000到600000。結構:長而緊密的螺旋管形。這種緊實的結構是與其貯藏功能相適應的。遇碘顯蘭色。② 支鏈澱粉:在直鏈的基礎上每隔20-25個葡萄糖殘基就形成一個-(1-6)支鏈。不能形成螺旋管,遇碘顯紫色。澱粉酶:內切澱粉酶(α-澱粉酶)水解α-1.4鍵,外切澱粉酶(β-澱粉酶)α-1.4,脫支酶α-1.6。 2、 糖元 與支鏈澱粉類似,只是分支程度更高,每隔4個葡萄糖殘基便有一個分支。結構更緊密,更適應其貯藏功能,這是動物將其作為能量貯藏形式的一個重要原因,另一個原因是它含有大量的非原性端,可以被迅速動員水解。糖元遇碘顯紅褐色。
3、 纖維素結構 許多β-D-葡萄糖分子以β-(1-4)糖苷鍵相連而成直鏈。纖維素是植物細胞壁的主要結構成份,占植物體總重量的1/3左右,也是自然界最豐富的有機物,地球上每年約生產1011噸纖維素。經濟價值:木材、紙張、纖維、棉花、亞麻。完整的細胞壁是以纖維素為主,並粘連有半纖維素、果膠和木質素。約40條纖維素鏈相互間以氫鍵相連成纖維細絲,無數纖維細絲構成細胞壁完整的纖維骨架。降解纖維素的纖維素主要存在於微生物中,一些反芻動物可以利用其消化道內的微生物消化纖維素,產生的葡萄糖供自身和微生物共同利用。雖大多數的動物(包括人)不能消化纖維素,但是含有纖維素的食物對於健康是必需的和有益的。
4、 幾丁質(殼多糖) N-乙醯-D-葡萄糖胺以(1,4)糖苷鏈相連成的直鏈。
5、菊 糖 :多聚果糖,存在於菊科植物根部。
6、 瓊 脂 :多聚半乳糖,是某些海藻所含的多糖,人和微生物不能消化瓊脂。
不均一性多糖
有不同的單糖分子縮合而成的多糖,叫做不均一多糖。常見的有:透明質酸、硫酸軟骨素等。
有一些不均一性多糖由含糖胺的重復雙糖系列組成,稱為糖胺聚糖(glyeosaminoglycans,GAGs),又稱粘多糖。(mucopoly saceharides)、氨基多糖等。糖胺聚糖是蛋白聚糖的主要組分,按重復雙糖單位的不同,糖胺聚糖有五類:
1、透明質酸
2、硫酸軟骨素
3、硫酸皮膚素
4、硫酸用層酸
5、肝素
6、硫酸乙醯肝素
植物活性多糖的提取方法有多種,在水提醇沉的基礎上,常採用酶解、微波、超聲波,膜處理和CO<2>超臨界萃取等方法進行輔助提取或精製.最常用的還是水提醇沉法.
舉例: 蒽酮比色法,具體步驟
一、儀器、試劑和材料
1.儀器:電子天平,超聲波清洗器,電熱恆溫水浴鍋,抽濾設備,分光光度計,容量瓶,刻度吸管等
2.試劑:
(1)葡萄糖標准液:l00 µg/mL
(2)濃硫酸
(3)蒽酮試劑:0.2 g蒽酮溶於100 mL濃 H2SO4中。當日配製使用。
3.材料:甜高粱,甘草
二.操作步驟
1.葡萄糖標准曲線的製作
取7支大試管,按下表數據配製一系列不同濃度的葡萄糖溶液:
管號
1
2
3
4
5
6
7
葡萄糖標准液(mL)
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.6
0.8
蒸餾水(mL)
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.4
0.2
葡萄糖含量(µg)
0
10
20
30
40
60
80
在每支試管中立即加入蒽酮試劑4.0mL,迅速浸於冰水浴中冷卻,各管加完後一起浸於沸水浴中,管口加蓋,以防蒸發。自水浴沸騰起計時,准確煮沸l0 min,取出,用冰浴冷卻至室溫,在620 nm波長下以第一管為空白,迅速測其餘各管吸光值。以標准葡萄糖含量(µg)為橫坐標,以吸光值為縱坐標,繪出標准曲線。
2.植物樣品中可溶性糖的提取:將樣品粉碎,105 ºC烘乾至恆重,精確稱取1~5 g,置於50mL三角瓶中,加沸水25mL,加蓋,超聲提取10 min,冷卻後過濾(抽濾),殘渣用沸蒸餾水反復洗滌並過濾(抽濾),濾液收集在50mL容量瓶中,定容至刻度,得可溶性糖的提取液。
3.稀釋:吸取提取液2mL,置於另一50mL容量瓶中,以蒸餾水定容,搖勻。
4.測定:吸取1 mL已稀釋的提取液於試管中,加入4.0 mL蒽酮試劑,平行三份;空白管以等量蒸餾水替代提取液。以下操作同標准曲線製作。根據A620平均值在標准曲線上查出葡萄糖的含量(µg)。
三、結果處理:
C × V總 × D
樣品含糖量(%)= ————————————— × 100%
W × V測 × 106
其中:C——在標准曲線上查出的糖含量(µg),
V總——提取液總體積(mL),
V測——測定時取用體積(mL),
D——稀釋倍數,
W——樣品重量(g),
106——樣品重量單位由g換算成µg的倍數
溶劑提取法
溶劑提取法是從植物中提取多糖的常用方法,溶劑提取法首先要考慮的因素是選擇溶劑,一般應遵循相似相溶的原則,即極性強的有效成分選擇極性強的溶劑,極性弱的成分選擇極性弱的溶劑。多糖是極性大分子化合物,應選擇水、醇等極性強的溶劑。在所有溶劑中,水是典型的強極性溶劑,對植物組織的穿透力
強,提取效率高,在生產上使用安全。它能用於各種植物多糖,被廣泛應用。用水作溶劑來提取多糖時,可以用熱水浸煮提取,也可以用冷水浸提。水提取的多糖大多是中性多糖。一般植物多糖提取多數採用熱水浸提法,該法所得多糖提液可直接或離心除去不溶物;或者利用多糖不溶於高濃度乙醇的性質,用高濃度乙醇沉澱提純多糖;但由於不同性質或不同相對分子質量的多糖沉澱所需乙醇濃度不同,它也可以用於樣品中不同多糖組分的分級分離;還可按多糖不同性質在粗分階段利用混合溶劑提取法對植物中不同的多糖進行分離;其中,以乙醇沉澱最為普遍。劉青梅等在紫菜粗多糖提取方式研
究中,熱水提取控制條件為:溫度為20~100℃,水與紫
菜的液固質量比為50:1,提取時間30~180min,經多次
試驗最終得率為2.05%。周峙苗得到熱水浸提羊棲菜
多糖的最佳因素:浸提溫度為煮沸(102℃),pH為3.0,
浸提時間為3h,液固質量比為40:1。李戰對三種紫球
藻的提取工藝研究表明,三種紫球藻的最佳提取工藝
各不相同。銅綠紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
5%,乙醇用量為3倍體積,醇沉時間為1.5h。氯仿與正
丁醇的比例4:1,樣液與Sevag試劑的比例1:2,作用時
間為15min。淡色紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
75%,乙醇用量為2倍體積,醇沉時間為1h,氯仿與正
丁醇的比例3:1,樣液與Sevag試劑的比例1:2,作用時
間為45min。血色紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
50%。乙醇用量為1倍體積,醇沉時間為0.5h,氯仿與
正丁醇的比例4:1,樣液與Sevag試劑的比例2:1,作用
時間為45min。
酸鹼提取法
有些多糖適合用稀酸或鹼溶液提取,才能得到更
高的提取率。但酸鹼提取法有其特殊性,因多糖類的不
同而異。只在一些特定的植物多糖提取中佔有優勢,而
且即使有優勢,在操作上還應嚴格控制酸鹼度。因為
某些多糖在酸性或者鹼性較強時,可能引起多糖中糖
苷鍵的斷裂。另外,稀酸、稀鹼提取液應迅速中和或迅
速透析,濃縮與醇析而獲得多糖沉澱。趙宇等對海篙
子多糖的提取方法研究發現,從硫酸根含量及粗多糖
產率看酸提方法好於水提方法。具體方法為:100g海
篙子乾粉,加入1000ml 0.1mo1/L HCL溶液提取。室溫
攪拌1h後過濾,重復操作三遍,合並濾液;濾液減壓濃
縮至總體積的1/5,再加入95%乙醇至乙醇濃度達
30%,沉澱,離心除去沉澱中的褐藻酸,繼續向上清液
中加入乙醇至乙醇濃度達7%。室溫放置過夜使沉澱
完全,離心,沉澱乾燥得海篙子粗多糖,多次試驗算得
平均產率為3.35%。
孟憲元等在茜草多糖提取研究中發現酸提相對
多於水提,以稀酸提取茜草多糖,產品純度較高。具體
方法如下茜草根粗粉1000g 5%HCL浸泡、離心、取上
清液加入ETOH並調節至濃度為7%,靜置,2500rpm
離心,收集棕色沉澱物,95%ETOH洗滌3次,用45%
HCL溶解。加1%活性炭脫色,真空抽濾,濾液4℃過
夜,棄去容器底部少許沉澱物。溶液置透析袋內,逆水
法透析3d,冷凍乾燥,得白色粉末狀多糖約10g。
Hayashi Katsuhiko發明了一種從綠色藻類中提取酸
性多糖的方法,而這種多糖用常規的熱水法是無法得到的。具體過程為:將乾燥的綠藻粉末製成懸浮液,熱
水浸泡提取或將含水綠藻直接用熱水提取後離心分
離,取粘稠的固狀物,加入鹼水,在pH≥10的條件下
再進行攪拌提取,鹼水提取液在攪拌的同時加入酸水
調節pH值為3.0~4.0,靜置沉降後離心得酸性多糖。
1.3生物酶提取法
酶技術是近年來廣泛應用到有效成份提取中的一
項生物技術,在多糖的提取過程中,使用酶可降低提取
條件,在比較溫和的條件中分解植物組織,加速多糖的
釋放或提取。此外,使用酶還可分解提取液中澱粉、果
膠、蛋白質等的產物,常用的酶有蛋白酶,纖維素酶,果
膠酶等。孟江研究不同酶對大棗渣多搪提取效果的
影響,根據多糖得率、多糖含量及蛋白質含量進行綜合
評分得到最適合的酶為復合酶2(先胰蛋白酶提取,後
木瓜蛋白酶提取),接下來依次是木瓜蛋白酶、復合酶、
(木瓜蛋白酶+胰蛋白酶)、胰蛋白酶、胃蛋白酶
(pH=7.0)、胃蛋白酶(pH=2.0)。復合酶2作用條件溫
和,多糖得率及含量較高,且蛋白含量較低,實為一種
理想的酶提取劑。通過進一步正交實驗考察得出最佳
工藝:先用胰蛋白酶3%,40倍體積在pH=7.0,65℃溫
浸1.5h後,再加木瓜蛋白酶2.5%,在pH=7.0,50℃水
溫浸1h,過濾殘渣加40倍體積水,迅速升溫至80℃,
然後溫浸1.5h。
此外,植物多糖的提取方法還有超濾法,超聲波強
化法,微波法等等。植物多糖的提取方法和技術在不斷
改進和創新,但對於同一種方法和技術又需在不同植
物多糖的提取中研究考察。在選取提取分離方法的同
時,應當根據目標多糖的特點、物理化學性質,綜合比
較,進行實驗,選取最佳方法和提取工藝。
Ⅸ 常見的多糖有哪些 他們的提取方法比較
多糖的廣義分類分為: 均一性多糖和不均一性多糖。
均一性多糖:
由一種單糖分子縮合而成的多糖,叫做均一性多糖。自然界中最豐富的均一性多糖是澱粉和糖原、纖維素。它們都是由葡萄糖組成。澱粉和糖原分別是植物和動物中葡萄糖的貯存形式,纖維素是植物細胞主要的結構組分。
1、 澱粉 澱粉是植物營養物質的一種貯存形式,也是植物性食物中重要的營養成分,分為直鏈澱粉和支鏈澱粉。① 直鏈澱粉:許多α-葡萄糖以α(1-4)糖苷鍵依次相連成長而不分開的葡萄糖多聚物。典型情況下由數千個葡萄糖線基組成,分子量從150000到600000。結構:長而緊密的螺旋管形。這種緊實的結構是與其貯藏功能相適應的。遇碘顯蘭色。② 支鏈澱粉:在直鏈的基礎上每隔20-25個葡萄糖殘基就形成一個-(1-6)支鏈。不能形成螺旋管,遇碘顯紫色。澱粉酶:內切澱粉酶(α-澱粉酶)水解α-1.4鍵,外切澱粉酶(β-澱粉酶)α-1.4,脫支酶α-1.6。 2、 糖元 與支鏈澱粉類似,只是分支程度更高,每隔4個葡萄糖殘基便有一個分支。結構更緊密,更適應其貯藏功能,這是動物將其作為能量貯藏形式的一個重要原因,另一個原因是它含有大量的非原性端,可以被迅速動員水解。糖元遇碘顯紅褐色。
3、 纖維素結構 許多β-D-葡萄糖分子以β-(1-4)糖苷鍵相連而成直鏈。纖維素是植物細胞壁的主要結構成份,占植物體總重量的1/3左右,也是自然界最豐富的有機物,地球上每年約生產1011噸纖維素。經濟價值:木材、紙張、纖維、棉花、亞麻。完整的細胞壁是以纖維素為主,並粘連有半纖維素、果膠和木質素。約40條纖維素鏈相互間以氫鍵相連成纖維細絲,無數纖維細絲構成細胞壁完整的纖維骨架。降解纖維素的纖維素主要存在於微生物中,一些反芻動物可以利用其消化道內的微生物消化纖維素,產生的葡萄糖供自身和微生物共同利用。雖大多數的動物(包括人)不能消化纖維素,但是含有纖維素的食物對於健康是必需的和有益的。
4、 幾丁質(殼多糖) N-乙醯-D-葡萄糖胺以(1,4)糖苷鏈相連成的直鏈。
5、菊 糖 :多聚果糖,存在於菊科植物根部。
6、 瓊 脂 :多聚半乳糖,是某些海藻所含的多糖,人和微生物不能消化瓊脂。
不均一性多糖
有不同的單糖分子縮合而成的多糖,叫做不均一多糖。常見的有:透明質酸、硫酸軟骨素等。
有一些不均一性多糖由含糖胺的重復雙糖系列組成,稱為糖胺聚糖(glyeosaminoglycans,GAGs),又稱粘多糖。(mucopoly saceharides)、氨基多糖等。糖胺聚糖是蛋白聚糖的主要組分,按重復雙糖單位的不同,糖胺聚糖有五類:
1、透明質酸
2、硫酸軟骨素
3、硫酸皮膚素
4、硫酸用層酸
5、肝素
6、硫酸乙醯肝素
植物活性多糖的提取方法有多種,在水提醇沉的基礎上,常採用酶解、微波、超聲波,膜處理和CO<2>超臨界萃取等方法進行輔助提取或精製.最常用的還是水提醇沉法.
舉例: 蒽酮比色法,具體步驟
一、儀器、試劑和材料
1.儀器:電子天平,超聲波清洗器,電熱恆溫水浴鍋,抽濾設備,分光光度計,容量瓶,刻度吸管等
2.試劑:
(1)葡萄糖標准液:l00 µg/mL
(2)濃硫酸
(3)蒽酮試劑:0.2 g蒽酮溶於100 mL濃 H2SO4中。當日配製使用。
3.材料:甜高粱,甘草
二.操作步驟
1.葡萄糖標准曲線的製作
取7支大試管,按下表數據配製一系列不同濃度的葡萄糖溶液:
管號
1
2
3
4
5
6
7
葡萄糖標准液(mL)
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.6
0.8
蒸餾水(mL)
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.4
0.2
葡萄糖含量(µg)
0
10
20
30
40
60
80
在每支試管中立即加入蒽酮試劑4.0mL,迅速浸於冰水浴中冷卻,各管加完後一起浸於沸水浴中,管口加蓋,以防蒸發。自水浴沸騰起計時,准確煮沸l0 min,取出,用冰浴冷卻至室溫,在620 nm波長下以第一管為空白,迅速測其餘各管吸光值。以標准葡萄糖含量(µg)為橫坐標,以吸光值為縱坐標,繪出標准曲線。
2.植物樣品中可溶性糖的提取:將樣品粉碎,105 ºC烘乾至恆重,精確稱取1~5 g,置於50mL三角瓶中,加沸水25mL,加蓋,超聲提取10 min,冷卻後過濾(抽濾),殘渣用沸蒸餾水反復洗滌並過濾(抽濾),濾液收集在50mL容量瓶中,定容至刻度,得可溶性糖的提取液。
3.稀釋:吸取提取液2mL,置於另一50mL容量瓶中,以蒸餾水定容,搖勻。
4.測定:吸取1 mL已稀釋的提取液於試管中,加入4.0 mL蒽酮試劑,平行三份;空白管以等量蒸餾水替代提取液。以下操作同標准曲線製作。根據A620平均值在標准曲線上查出葡萄糖的含量(µg)。
三、結果處理:
C × V總 × D
樣品含糖量(%)= ————————————— × 100%
W × V測 × 106
其中:C——在標准曲線上查出的糖含量(µg),
V總——提取液總體積(mL),
V測——測定時取用體積(mL),
D——稀釋倍數,
W——樣品重量(g),
106——樣品重量單位由g換算成µg的倍數
溶劑提取法
溶劑提取法是從植物中提取多糖的常用方法,溶劑提取法首先要考慮的因素是選擇溶劑,一般應遵循相似相溶的原則,即極性強的有效成分選擇極性強的溶劑,極性弱的成分選擇極性弱的溶劑。多糖是極性大分子化合物,應選擇水、醇等極性強的溶劑。在所有溶劑中,水是典型的強極性溶劑,對植物組織的穿透力
強,提取效率高,在生產上使用安全。它能用於各種植物多糖,被廣泛應用。用水作溶劑來提取多糖時,可以用熱水浸煮提取,也可以用冷水浸提。水提取的多糖大多是中性多糖。一般植物多糖提取多數採用熱水浸提法,該法所得多糖提液可直接或離心除去不溶物;或者利用多糖不溶於高濃度乙醇的性質,用高濃度乙醇沉澱提純多糖;但由於不同性質或不同相對分子質量的多糖沉澱所需乙醇濃度不同,它也可以用於樣品中不同多糖組分的分級分離;還可按多糖不同性質在粗分階段利用混合溶劑提取法對植物中不同的多糖進行分離;其中,以乙醇沉澱最為普遍。劉青梅等在紫菜粗多糖提取方式研
究中,熱水提取控制條件為:溫度為20~100℃,水與紫
菜的液固質量比為50:1,提取時間30~180min,經多次
試驗最終得率為2.05%。周峙苗得到熱水浸提羊棲菜
多糖的最佳因素:浸提溫度為煮沸(102℃),pH為3.0,
浸提時間為3h,液固質量比為40:1。李戰對三種紫球
藻的提取工藝研究表明,三種紫球藻的最佳提取工藝
各不相同。銅綠紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
5%,乙醇用量為3倍體積,醇沉時間為1.5h。氯仿與正
丁醇的比例4:1,樣液與Sevag試劑的比例1:2,作用時
間為15min。淡色紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
75%,乙醇用量為2倍體積,醇沉時間為1h,氯仿與正
丁醇的比例3:1,樣液與Sevag試劑的比例1:2,作用時
間為45min。血色紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
50%。乙醇用量為1倍體積,醇沉時間為0.5h,氯仿與
正丁醇的比例4:1,樣液與Sevag試劑的比例2:1,作用
時間為45min。
酸鹼提取法
有些多糖適合用稀酸或鹼溶液提取,才能得到更
高的提取率。但酸鹼提取法有其特殊性,因多糖類的不
同而異。只在一些特定的植物多糖提取中佔有優勢,而
且即使有優勢,在操作上還應嚴格控制酸鹼度。因為
某些多糖在酸性或者鹼性較強時,可能引起多糖中糖
苷鍵的斷裂。另外,稀酸、稀鹼提取液應迅速中和或迅
速透析,濃縮與醇析而獲得多糖沉澱。趙宇等對海篙
子多糖的提取方法研究發現,從硫酸根含量及粗多糖
產率看酸提方法好於水提方法。具體方法為:100g海
篙子乾粉,加入1000ml 0.1mo1/L HCL溶液提取。室溫
攪拌1h後過濾,重復操作三遍,合並濾液;濾液減壓濃
縮至總體積的1/5,再加入95%乙醇至乙醇濃度達
30%,沉澱,離心除去沉澱中的褐藻酸,繼續向上清液
中加入乙醇至乙醇濃度達7%。室溫放置過夜使沉澱
完全,離心,沉澱乾燥得海篙子粗多糖,多次試驗算得
平均產率為3.35%。
孟憲元等在茜草多糖提取研究中發現酸提相對
多於水提,以稀酸提取茜草多糖,產品純度較高。具體
方法如下茜草根粗粉1000g 5%HCL浸泡、離心、取上
清液加入ETOH並調節至濃度為7%,靜置,2500rpm
離心,收集棕色沉澱物,95%ETOH洗滌3次,用45%
HCL溶解。加1%活性炭脫色,真空抽濾,濾液4℃過
夜,棄去容器底部少許沉澱物。溶液置透析袋內,逆水
法透析3d,冷凍乾燥,得白色粉末狀多糖約10g。
Hayashi Katsuhiko發明了一種從綠色藻類中提取酸
性多糖的方法,而這種多糖用常規的熱水法是無法得到的。具體過程為:將乾燥的綠藻粉末製成懸浮液,熱
水浸泡提取或將含水綠藻直接用熱水提取後離心分
離,取粘稠的固狀物,加入鹼水,在pH≥10的條件下
再進行攪拌提取,鹼水提取液在攪拌的同時加入酸水
調節pH值為3.0~4.0,靜置沉降後離心得酸性多糖。
1.3生物酶提取法
酶技術是近年來廣泛應用到有效成份提取中的一
項生物技術,在多糖的提取過程中,使用酶可降低提取
條件,在比較溫和的條件中分解植物組織,加速多糖的
釋放或提取。此外,使用酶還可分解提取液中澱粉、果
膠、蛋白質等的產物,常用的酶有蛋白酶,纖維素酶,果
膠酶等。孟江研究不同酶對大棗渣多搪提取效果的
影響,根據多糖得率、多糖含量及蛋白質含量進行綜合
評分得到最適合的酶為復合酶2(先胰蛋白酶提取,後
木瓜蛋白酶提取),接下來依次是木瓜蛋白酶、復合酶、
(木瓜蛋白酶+胰蛋白酶)、胰蛋白酶、胃蛋白酶
(pH=7.0)、胃蛋白酶(pH=2.0)。復合酶2作用條件溫
和,多糖得率及含量較高,且蛋白含量較低,實為一種
理想的酶提取劑。通過進一步正交實驗考察得出最佳
工藝:先用胰蛋白酶3%,40倍體積在pH=7.0,65℃溫
浸1.5h後,再加木瓜蛋白酶2.5%,在pH=7.0,50℃水
溫浸1h,過濾殘渣加40倍體積水,迅速升溫至80℃,
然後溫浸1.5h。
此外,植物多糖的提取方法還有超濾法,超聲波強
化法,微波法等等。植物多糖的提取方法和技術在不斷
改進和創新,但對於同一種方法和技術又需在不同植
物多糖的提取中研究考察。在選取提取分離方法的同
時,應當根據目標多糖的特點、物理化學性質,綜合比
較,進行實驗,選取最佳方法和提取工藝。
Ⅹ 跪求用超聲波提取當歸多糖的步驟,越詳細越好。
稱取當歸 200 g,置圓底燒瓶中,加石油醚 500 mL, 75 ℃迴流 1 h脫脂,
過濾,殘渣揮干溶劑,然後用 80%的乙醇 500 mL 浸漬過夜,
超聲提取 2 次,每次 1 h,過濾,葯渣加蒸餾水 1 000 mL 浸漬 1 h,超聲提取 30 min,過濾,
再加 500 mL 蒸餾水,超聲提取 30 min,過濾,合並濾液,減壓濃縮至 150 mL,
用氯仿萃取 3 次,以除去蛋白質。 加1%活性炭脫色 2 次,抽濾,濾液加乙醇使含醇量達 80%,
於冰箱中靜置過夜,過濾,殘渣先後用 95%乙醇、 無水乙醇、 乙醚、 丙酮依次洗滌, 60 ℃ 烘乾至恆重,即得精製當歸多糖