酶切位点如何切割dna
㈠ 什么是限制性内切酶它识别和切割DNA分子有何特点
限制来性内切酶是一种可以源特异性识别特定的DNA位点并对该DNA分子进行切割的一种酶。它识别的位点一般为回文序列，有这个位点就会切，但不一定是在特异性位点附近切割（可能会将具有这个位点的DNA随意切割，也可能只在位点附近或位点处切割，要看这种内切酶的类型）。
㈡ DNAman 怎么分析序列的酶切位点
将待分析的序列装入Channel,点击要分析的Channel,然后通过Restriction/Analysis 命令打开对话框.
参数说明如下：
Results 分析结果显示
其中包括：
Show summary（显示概要） Show sites on sequence（在结果中显示酶切位点）
Draw restriction map（显示限制性酶切图）Draw restriction pattern（显示限制性酶切模式图）
Ignore enzymes with more than（忽略大于某设定值的酶切位点）
Ignore enzymes with less than（忽略小于某设定值的酶切位点）
Target DNA （目标DNA 特性）
circular（环型DNA）,dam/dcm methylation（dam/dcm 甲基化）
参数说明如下：
Enzyme
代表（enzyme data file）,点击旁边的下拉按钮,出现两个默认选项,restrict.enz 和dnamane.enz,
如果添加过自制的酶列表,则附加显示自制酶列表文件名.其中restrict.enz 数据文件包含180 种
限制酶,dnamane.enz 数据文件包含2524 种限制酶.选择其中一个数据文件,相应的酶在左边的 显示框中列出（按酶名称字母表顺序）,鼠标双击酶名称,则对应的酶被选中,在右边空白框中列 出.要自制酶切列表,可以从左边酶列表中双击鼠标选择多种酶（例如puc18 multiple cloning sites）,然后点击按钮出现下列对话框：输入要保存酶列表的文件名,点击按钮即可保存.自制酶列表可以方便分析特定的酶切位点.
Cutter 酶切识别序列长度；End 酶切产生的末端,其中包括,Blunt（平头末端）,5’Overhang
（5’突出粘性末端）,3’Overhang(3’突出粘性末端),系统根据cutter 和end 的设定情况,在左边酶列表 中显示符合条件的酶.最后,点击按钮执行操作.
㈢ 如何使限制性内切酶切割dna的反应顺利进行
内切酶主要分成三大类。
第一类内切酶能识别专一的核苷酸顺序，并在识别点附近的一些核苷酸上切割DNA分子中的双链，但是切割的核苷酸顺序没有专一性，是随机的。这类限制性内切酶在DNA重组技术或基因工程中没有多大用处，无法用于分析DNA结构或克隆基因。这类酶如EcoB、EcoK等。
第二类内切酶能识别专一的核苷酸顺序，并在该顺序内的固定位置上切割双链。由于这类限制性内切酶的识别和切割的核苷酸都是专一的。所以总能得到同样核苷酸顺序的DNA片段，并能构建来自不同基因组的DNA片段，形成杂合DNA分子。因此，这种限制性内切酶是DNA重组技术中最常用的工具酶之一。这种酶识别的专一核苷酸顺序最常见的是4个或6个核苷酸，少数也有识别5个核苷酸以及7个、9个、10个和11个核苷酸的。如果识别位置在DNA分子中分布是随机的，则识别4个核苷酸的限制性内切酶每隔46（4096）个核苷酸就有一个切点。人的单倍体基因组据估计为3×199核苷酸，识别4个核苷酸的限制性内切酶的切点将有（3×109/2.5×102）约107个切点，也就是可被这种酶切成107片段，识别6个核苷酸的限制性内切酶也将有（3×109/4×103）约106个切点。
第二类内切酶的识别顺序是一个回文对称顺序，即有一个中心对称轴，从这个轴朝二个方向“读”都完全相同。这种酶的切割可以有两种方式。一是交错切割，结果形成两条单链末端，这种末端的核苷酸顺序是互补的，可形成氢键，所以称为粘性末端。如EcoRI的识别顺序为：
↓ |
5’……GAA | TTC……3’
3’……CTT | AAG……5’
| ↑
垂直虚线表示中心对称轴，从两侧“读”核苷酸顺序都是GAATTC或CTTAAG，这就是回文顺序（palindrome）。实线剪头表示在双链上交错切割的位置，切割后生成5’……G和AATTC……3’、3’……CTTAA和G……5’二个DNA片段，各有一个单链末端，二条单链是互补的，可通过形成氢键而“粘合”。另一种是在同一位置上切割双链，产生平头末端。例如HaeⅢ的识别位置是：
↓
5’……GG↓CC……3’
3’……CC↓GG……’
↑
在箭头所指处切割，产生的两个DNA片段是：
5’……GG CC……3’
和
3’……CC GG……5’
有时候两种限制性内切酶的识别核苷酸顺序和切割位置都相同，差别只在于当识别顺序中有甲基化的核苷酸时，一种限制性内切酶可以切割，另一种则不能。例如HpaⅡ和MspⅠ的识别顺序都是5’……CCGG……3’，如果其中有5’-甲基胞嘧啶，则只有HpaⅡ能够切割。这些有相同切点的酶称为同切酶或异源同工酶（isoschizomer）。
第三类内切酶也有专一的识别顺序，但不是对称的回文顺序。它在识别顺序旁边几个核苷酸对的固定位置上切割双链。但这几个核苷酸对则是任意的。因此，这种限制性内切酶切割后产生的一定长度DNA片段，具有各种单链末端。这对于克隆基因或克隆DNA片段没有多大用处。
㈣ 限制性内切酶如何切割，外源DNA怎么连上去
这一过程需借助两种酶：限制性核酸内切酶和DNA连接酶。
限制性核酸内专切酶是可以识别特定的脱属氧核苷酸序列，并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶，简称限制酶。
DNA连接酶利用NAD或ATP中的能量催化两个核酸链之间形成磷酸二酯键。反应过程可分三步：
(1)NAD+或ATP将其腺苷酰基转移到DNA连接酶的一个赖氨酸残基的ε─氨基上形成共价的酶-腺苷酸中间物，同时释放出烟酰胺单核苷酸(NMN)或焦磷酸。
(2)将酶-腺苷酸中间物上的腺苷酰基再转移到DNA的5'-磷酸基端，形成一个焦磷酰衍生物，即DNA-腺苷酸;
(3)这个被激活的5'-磷酰基端可以和DNA的3'-OH端反应合成磷酸二酯键，同时释放出AMP。
㈤ 限制性内切酶能切割DNA单链吗
1. 有少数限制性内切酶能切割DNA单链，效率满低的。
2. 在末端加一些ggcc的和单双链没有关系，个人觉得和酶与DNA识别binding的结构有关。
㈥ 两种酶怎么切割DNA请画图，还有目的基因的切割
这是高中生物选修阶段的内容，DNA有链装和环装两种，两种酶的切割位点未知，目的回基因也不知道是答处于哪个位置，建议给出具体的题目来更好的解答。
如果要获取目的基因，那两种酶不能破坏他，然后用两种酶可以防止自身环化
㈦ 切割dna片段产物长度怎么计算
C 分 析： A项中，DNA单链中相邻两个碱基之间通过“脱氧核糖—磷酸—脱氧核糖”连接，正确； B项中，Sma I识别的序列为CCCGGG，切割后会产生平末端；图1所示的DNA分子中含有两个Sma I的识别位点，第一个识别位点在左端534bp序列向右三个碱基对的位置；第二个识别位点在右端658bp序列向左三个碱基对的位置，从这两个位点切割后产生的DNA片段长度分别为534+3，796-3-3，658+3，即得到的DNA片段长度分别为537bp、790bp和661bp，正确。 C项中，能够获取目的基因并切开质粒的限制酶有识别序列为GGATCC的BamH I和识别序列为GATC的Mbo I，若使用Mbo I会同时破坏质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因，所以要用BamH I来切割目的基因和质粒，切割后保留了完整的抗生素B抗性基因，便于筛选出含有重组质粒的大肠杆菌。错误。 D项中，重组质粒含有抗生素抗性基因，因此成功导入目的基因的大肠杆菌可以抗抗生素，因此一般需要用添加相应抗生素的培养基进行筛选。正确。 考点： 基因工程的操作程序 点评： 本题有一定的难度，是一道高考题的变式，考查了学生的识图能力、审题能力、理解能力。
㈧ 限制性核酸内切酶是怎样切割DNA的
不可以
限制性核酸内切酶是识别并切割特异的双链dna序列的一种内切核酸酶。它能识别内双链分子的某种特定核苷酸容序列，使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，而且只能切割dna，不能切割rna。另外，根据酶的专一性也能得出答案
㈨ 限制性核酸内切酶如何切割目的基因（高悬赏）
限制性内切酶的作用机制太复杂了
不同的限制性内切酶作用方式都不一样
根据维基百回科，可以分为答Type1、2、3、4等多种
不过大体来说，限制性内切酶都能够特异性识别并结合核酸的特殊反向回文序列（Inverted repeat palindromes ），然后催化断裂核苷酸链
更多细节请参考http://en.wikipedia.org/wiki/Restriction_enzyme
㈩ 限制性内切酶如何将dna剪切成不同大小的片段
A、A选项中用B酶单独切割形成0.5kb、1.9kb和5.6kb三种长度的DNA片段，与实验结果不符，A错误；
B、内B选项中容用A酶切割形成4.2kb、3.8kb两种长度的DNA片段，与实验结果不符，B错误；
C、C选项中三种酶切位点按照图示切法后形成DNA片段的长度与图示相同，C正确；
D、D选项中A酶切割形成4.2kb、3.8kb两种长度的DNA片段，与实验结果不符，D错误；
故选：C．