为什么用同一种限制酶切割目的基因和质粒

① .不同的限制酶切割目的基因和质粒有什么优点为什么一般选用大肠杆菌作为受体

一般会使用相同的两个限制性核酸内切酶对目的基因和载体进行切割专，使它们产生相同的属末端，可以在T4 dna 连接酶的作用下，进行连接反应，构建重组质粒。
一般在构建重组质粒的时候都会先用大肠杆菌做克隆，因为大肠杆菌的步骤简单，培养方便，提取质粒方便。
望采纳

② 为什么必须使用同一种限制酶对载体和目的基因进行切割

不是同一种
是同种
用A和B限制酶切割载体,用C和D切目的基因
要求A=C或D,B=D或C,这是教科书的意思
你的理解是A=B=C=D

③ 为何基因工程中，载体和目的基因要用同一种限制酶切割。既然这样，那为什么为了防止粘性末端乱连接，要

什么时候要用两种限制酶切了？把目的基因与载体切好后，聚合，会有目的-目的、载体-载体、目的-载体的基因，要的是目的载体的那一部分，然后就需要标记基因了

④ 目的基因和质粒为什么要用一种限制酶切割限制酶和DNA连接酶作用的位点相同么

1.只有这样才能保证切得是同一位点
2.一样

⑤ 为什么用同一种限制酶处理质粒和外源DNA形成方式很多

为什么用同一种限制酶处理质粒和外源DNA形成方式很多
（1）质粒切割前是双链环状DNA分子，所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键，故不含游离的磷酸基团．从图1可以看出，质粒上只含有一个SmaⅠ的切点，因此被改酶切割后，质粒变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团．
（2）DNA分子的一条多核苷酸链中，两个脱氧核苷酸之间以磷酸基团和五碳糖相连．由题目可知，SmaⅠ识别的DNA序列只有G和C．
（3）用SmaⅠ酶切割外源DNA和质粒来重组质粒，其结果是目的基因与抗性基因被破坏．
（4）将游离末端重新结合形成DNA使用的是连接酶，获得的环状DNA可能有：原质粒切割的粘性末端重新连接；目的基因的粘性末端连接而成环状；目的基因与切割质粒形成重组质粒．
（5）如果使用BamHⅠ和HinRⅢ两种限制酶同时处理外源DNA和质粒，比用EcoRⅠ酶切割的优点是：避免切割的外源DNA、质粒的粘性末端自身环化．
（6）导入重组质粒的大肠杆菌能在含有抗生素B的培养基上生存，因此为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加抗生素的培养基培养．

⑥ 高中生物 为何用相同限制酶切割目的基因和质粒

这样可以使切割后的目的基因与质粒连接上

⑦ 为什么必须使用同一种限制酶对载体和目的基因进行切割

为了产生相同黏性末端

⑧ 为什么同种限制酶切割形成的末端相同时目的基因与质粒会反向连接，为什么会有反向连接这种情况。目的基因

限制酶的识别位点大多是反向对称的，如果只用用同种酶切，所得片段的2端序列相同，在连接时，是随机连接，不仅会出现反向连接，而且会出现片段串联。

在分子克隆实验中，我们会用两种酶分别切目的基因和质粒的上下游，这样就保证了目的片段和质粒片段在连接时的方向性，如上游都用EcoR I，下游都用BamH。

你所理解的“目的基因与质粒不就是本应该用同一种限制酶切割”，指的就是两者上游同用一种，下游又同用另一种，而不是指上下游都用同一种酶切。

除非是某些特殊情况，不得不用一种酶切上下游，这样会出现大量的反向连接，连接后，需要多挑些克隆鉴定。

个人见解，仅供参考，祝好！

⑨ 为什么要两种酶才能切割基因（两端要不同的限制酶），不能是同一种吗

切割目的基因时同种序列当然可以用同种限制酶切割；但有时也用不同种的限制性酶专割。属
用不同限制酶切割的目的是：保证目的基因和质粒（运载体）的准确连接，避免无效连接（如：目的基因—目的基因连接物、质粒自身环化等）过多。可以用不同限制酶切割相同序列的原理：
虽然一种限制酶只能识别一种特定的氨基酸序列，但两种限制酶识别的序列可以相包含，例：酶A识别GGATCC序列，酶B识别GATC序列，则GGATCC序列就可以被两种限制酶切割。哪里不明白请追问，满意请采纳，希望对你有帮助~

⑩ 既然用同一种限制酶切割载体和目的基因会发生自连 为什么还要这么做

不是同一种
是同种
用A和B限制酶切割载体，用C和D切目的基因
要求A=C或D，B=D或C，这是教科书的意思
你的理解是A=B=C=D