抗原修复高压修复用什么仪器
❶ 抗原修复的注意事项
①该试剂也应注意有多种不同的含水分子量。
②该贮存液久放后可出现结晶。每次使用前,先取出回至室温,摇晃其结晶溶解,也可用微波炉促其快速溶解,然后再用。
0.01M PBS工作液的配制:
取一2000ml的容量瓶一个,装入已称好的NaCt18g,加入少量蒸馏水让其彻底溶解,再加入 Ⅰ液13ml,Ⅱ液87ml,加蒸馏水凑足2000ml,即可使用,即可使用该溶液在室温下可保存3-4周,但以新配为佳。
PBS工作液配制完毕后,都要测其PH值,如果偏酸,可用氢氧化钠来调试,如果偏碱可用HCl调试,测试有如下n种方法:
①PH测试笔测试,这是一种简便、易行、结果较为准确的测试方法。当配制完PBS后,取一小杯,倒入配好的PBS,插入测试笔,打开开关,小屏幕上将可出现测出的PH结果。PH如果7.6不足,小量的可用0.2M Na2HPO4调校,大量的可用氢氧化钠调校。PH如果高于7.6,小量的用0.2M NaH2PO4调校,大量的可用HCL来调校。
②用试纸来测试:PH试纸有两种,一种为广泛PH试纸,范围在1-14,另一种是精密试纸有各种各样的范围。但是,作为冲洗切片用的PBS,其精确度不需要十分精确,如配PH7.6时,测试时在PH7.5或7.7,都可使用。试纸测试PH值,停靠其反应的颜色来确定,十分简便,一般的试剂都可用它来测试。
③仪器测试:对于要求较高,需较准确的PH值,须彩用仪器测试。
1. Tris缓冲溶液(Tris buffer solution,TBS)
①1N HCL ,浓HCL(双重1.19)8.3ml,先取50ml蒸馏水,加入HCL再加水到100ml。
②0.5M Tris-HCL缓冲液(PH7.6)
取Tris(羟甲基氨基甲烷)6.57g,加入少许的蒸馏水搅拌,直至溶解,再加入1N HCL42ml,然后用蒸馏水凑足100ml,于4℃冰箱保存。
临用时,将上述溶液10稀释倍,即为0.05M工作液。
❷ 抗原修复液怎么选择
PBS是磷来酸盐缓冲液,主要组成成分为NaH2PO4.2H2O和源Na2HPO4.12H2O及NaCl或KCl。使用浓度一般为0.1M和0.01M,PH7.2-7.5,做免疫组化一般多使用此缓冲液。根据配方配制即可,没有听说过用PBS作为抗原修复液的。 TBS是Tris(三羟甲基氨基甲烷)盐缓冲液,主要组成成分为100mMTris.Cl (PH7.5)和0.9%(W/V)NaCl,做WB一般多使用此缓冲液。石蜡切片免疫组化比较难表达的抗原有时也用此缓冲液进行修复。
❸ 进行抗原修复实验用什么方法
真空负来压抗原修复法:
①源
切片脱蜡至水。
②0.3%H2O2甲醇真空负压处理5分钟。
③自来水洗,蒸馏水洗。
④0.01M柠檬酸盐缓冲液(PH6.0),真空负压干燥箱预先调至95℃,真空负压处理10分钟。
⑤待修复注降至室温的一,PBS洗3次,随后按选好的免疫组化染色方法进行染色。
生物帮上面有这方面的详细介绍,
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❹ 免疫组化抗原修复用电磁炉可以吗
免疫组化修复有几种:1高压高温修复。用高压锅,定时。2水浴修复。电磁炉等水专浴定时属。3微波炉修复。定时。4酶修复。定时。
几种修复1-3,都需要将片子放在修复盒中,盒中放入修复液。定时,温度也要控制好,其中修复效果高温高压最好,其次微波炉修复。不过具体问题具体分析,看不同的切片,有不同的修复条件,有的可能不适合高温高压,建议先选择微波炉或者水浴修复,预实验看看效果。
❺ 关于微波炉抗原修复
①该试剂也应注意有多种不同的含水分子量。
②该贮存液久放后可出现结晶。每次使用前,先取出回至室温,摇晃其结晶溶解,也可用微波炉促其快速溶解,然后再用。
0.01M PBS工作液的配制:
取一2000ml的容量瓶一个,装入已称好的NaCt18g,加入少量蒸馏水让其彻底溶解,再加入 Ⅰ液13ml,Ⅱ液87ml,加蒸馏水凑足2000ml,即可使用,即可使用该溶液在室温下可保存3-4周,但以新配为佳。
PBS工作液配制完毕后,都要测其PH值,如果偏酸,可用氢氧化钠来调试,如果偏碱可用HCl调试,测试有如下n种方法:
①PH测试笔测试,这是一种简便、易行、结果较为准确的测试方法。当配制完PBS后,取一小杯,倒入配好的PBS,插入测试笔,打开开关,小屏幕上将可出现测出的PH结果。PH如果7.6不足,小量的可用0.2M Na2HPO4调校,大量的可用氢氧化钠调校。PH如果高于7.6,小量的用0.2M NaH2PO4调校,大量的可用HCL来调校。
②用试纸来测试:PH试纸有两种,一种为广泛PH试纸,范围在1-14,另一种是精密试纸有各种各样的范围。但是,作为冲洗切片用的PBS,其精确度不需要十分精确,如配PH7.6时,测试时在PH7.5或7.7,都可使用。试纸测试PH值,停靠其反应的颜色来确定,十分简便,一般的试剂都可用它来测试。
③仪器测试:对于要求较高,需较准确的PH值,须彩用仪器测试。
1. Tris缓冲溶液(Tris buffer solution,TBS)
①1N HCL ,浓HCL(双重1.19)8.3ml,先取50ml蒸馏水,加入HCL再加水到100ml。
②0.5M Tris-HCL缓冲液(PH7.6)
取Tris(羟甲基氨基甲烷)6.57g,加入少许的蒸馏水搅拌,直至溶解,再加入1N HCL42ml,然后用蒸馏水凑足100ml,于4℃冰箱保存。
临用时,将上述溶液10稀释倍,即为0.05M工作液。
❻ 抗原修复中高压锅和微波炉哪个好
微波炉主要功抄能是:加热食袭物
高压锅主要功能是:快速烹饪食物
如果你平时用来加热剩饭、剩菜、剩汤比较多,就选微波炉
如果平时想煲烫比较多,就选高压锅,那个会节省比较多时间,容易熟
注:用高压锅时,一定要认真学习如何使用,否则容易引发安全引患问题!
❼ 做抗原修复用的柠檬酸钠缓冲液用高压灭菌吗
当然呀
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如果抄你对这个答案袭有什么疑问,请追问,
另外如果你觉得我的回答对你有所帮助,请千万别忘记采纳哟!
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❽ 抗原修复液 干了影响实验结果吗
让我来告诉你,
PBS是磷酸盐缓冲液,主要组成成分为NaH2PO42H2O和Na2HPO412H2O及NaCl或KCl。使用浓度一般为内01M和001M,PH72-75,做免疫组化一容般多使用此缓冲液。根据配制即可,没有听说过用PBS作为抗原修复液的。
TBS是Tris(三羟甲基氨基甲烷)盐缓冲液,主要组成成分为100mMTrisCl (PH75)和09%(W/V)NaCl,做WB一般多使用此缓冲液。石蜡切片免疫组化比较难表达的抗原有时也用此缓冲液进行修复。
愿我的答案对你有所帮助!
❾ 用什么方法进行抗原修复拜托了各位 谢谢
真空负压抗原修复法: ① 切片脱蜡至水。 ②0.3%H2O2甲醇真空负压处理5分钟。 ③自来水洗,蒸馏版水洗。 ④0.01M柠檬酸权盐缓冲液(PH6.0),真空负压干燥箱预先调至95℃,真空负压处理10分钟。 ⑤待修复注降至室温的一,PBS洗3次,随后按选好的免疫组化染色方法进行染色。 生物帮上面有这方面的详细介绍, http://proct.bio1000.com/101641/ 二抗产品批发, 二抗产品价格
❿ 抗原修复过程中高温会不会导致抗原变性
是不会的。