PCR仪器得到的是什么

⑴ PCR的原理是什么 的原理是什么，它有什么用途

四、影响PCR特异性的因素
通过上述内容。可以看出有许多因素可以影响PCR的特异性，在此我们作一归纳，供大家参考：①退火步骤的严格性：提高退火温度可以减少不匹配的杂交，从而提高特异性。②减短退火时间及延伸时间可以减少错误引发及错误延伸。③引物二聚体是最常见的副产品，降低引物及酶的浓度也可以减少错误引发，尤其是引物的二聚化。④改变MgCl2(有时KCl)浓度可以改进特异性，这可能是提高反应严格性或者对Taq酶的直接作用。⑤模板中如果存在次级结构，例如待扩增的片段易自行形成发夹结构时，可在PCR混合物中的4×dNTPs中加入7-脱氮-2’-脱氧鸟苷-5’-三磷酸（7-deaza-2’-deoxyguanosine-5’-trihosphate）(de7GTP)。用de7GTP与dGTP比例为3：1的混合物（150μmol/l de7GTP +50μmol/L dGTP）代替200μmol/l dGTP，则可阻非特异性产物的生成。
五、扩增平坡
扩增反应并不是可以无穷地进行下去的，经过一定的循环周期后需扩增的片段不再按指数增多而逐渐进入平坡；进入平坡的循环次数，取决于起始时存在的模板拷贝数以及合成的DNA总量。所谓平坡就是批PCR循环的后期，合成产物达0.3～1pmol时，由于产物的堆积，使原来以指数增加的速率变成平坦的曲线。
造成PCR进入平坡的原因有：引物和dNTP等消耗完毕、Taq酶失活，这几中因素在标准反应中均不会出现。此外，还有几种可能：
1．底物过剩因DNA合成量多于反应液中存在的Taq酶，在100μl反应液中含2.5Utaq酶而DNA合成量达1μg（3nmol脱氧核苷酸）时，开始变为底物过剩。延长延伸时间或添加Taq酶，可以克服之。但不实用，因每进行下一循环就要延长延伸时间一倍及多加一倍Taq酶，才能继续保持指数增长。
2．非特异性扩增产物的竞争与上述情况密切相关，此时不需要的DNA片段与需要的片段同时竞争聚合酶，要克服这一情况是要提高反应特异性，使不需要片段不能大量积聚。
3．退火时产物的单链自己缔合两条单链的DNA片段在退火时除了与引物缔合外，也可以自行缔合，这也会阻止产品增多。当产物浓度到达10pmol/100μl时即可发生此现象，除稀释外无法克服。
4．变性在高浓度产物条件下，产物解链不完全，以及最终产物的阻化作用（焦磷酸化，双链DNA）。
总而言之，PCR的条件是随系统的而异的，并无统一的最佳条件，先选用通用的条件扩增，然后稍稍改变各参数，可以达到优化，以取得优良的特异性和产率。

⑵ pcr仪是干什么的

用聚合酶链式反应扩增所需DNA片段

⑶ PCR仪工作原理

聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction ,简称PCR）是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。 它具有特异、敏感、产率高、 快速、 简便、重复性好、易自动化等突出优点；能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断；可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情，用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑。 二、PCR基本原理 基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性－－退火－－延伸三个基本反应步骤构成： 1、模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备； 2、模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合； 3、引物的延伸：DNA模板－－引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性－－退火－－延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍（Plateau）。到达平台期所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。 在此同时认识到蛋白质是接受RNA的遗传信息而合成的。50年代Zamecnik等在形态学和分离的亚细胞组分实验中已发现微粒体（microsome）是细胞内蛋白质合成的部位；1957年Hoagland、Zamecnik及Stephenson等分离出tRNA并对它们在合成蛋白质中转运氨基酸的功能提出了假设；1961年Brenner及Gross等观察了在蛋白质合成过程中mRNA与核糖体的结合；1965年Holley首次测出了酵母丙氨酸tRNA的一级结构；特别是在60年代Nirenberg、Ochoa以及Khorana等几组科学家的共同努力破译了RNA上编码合成蛋白质的遗传密码，随后研究表明这套遗传密码在生物界具有通用性，从而认识了蛋白质翻译合成的基本过程。 从分子生物学的发展过程，可以看到在近半个世纪中它是生命科学范围发展最为迅速的一个前沿领域，推动着整个生命科学的发展。至今分子生物学仍在迅速发展中，新成果、新技术不断涌现，但分子生物学的历史还短，积累的资料还不够。例如：在地球上千姿万态的生物携带庞大的生命信息，迄今人类所了解的只是极少的一部分，还未认识核酸、蛋白质组成生命的许多基本规律；又如即使到2005年我们已经获得人类基因组DNA3×109bp的全序列，确定了人的5-10万个基因的一级结构，但是要彻底搞清楚这些基因产物的功能、调控、基因间的相互关系和协调，要理解80%以上不为蛋白质编码的序列的作用等等，都还要经历漫长的研究道路。可以说分子生物学的发展前景光辉灿烂，道路还会艰难曲折。 平或放大真核细胞单拷贝基因，通过PCR方法都是不难完成的。 4、特异性强 作为引物的寡核苷酸与模板结合的正确性是决定反应产物是否特异的关键。 5、对原始材料质量要求低含微量（pg,ng）的目的DNA的粗制品或者总RNA，就可以用做反应起始材料来获取目的产物。 主要适用于生命科学、医学、农业科学、环境科学、考古学及历史事件解读和卫生安全方面。

⑷ PCR的原理是什么，它有什么用途

PCR的原理是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。

PCR最有价值的应用领域就是对感染疾病的诊断。理论上，只要样本有一个病原体存在，PCR就可以检测到。

在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。

但是，DNA聚合酶在高温时会失活，因此，每次循环都得加入新的DNA聚合酶，不仅操作烦琐，而且价格昂贵，制约了PCR技术的应用和发展。

(4)PCR仪器得到的是什么扩展阅读

标准的PCR过程分为三步：

1、DNA变性：（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA。

2、退火：（60℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。

3、延伸：（70℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dNTP为原料，从引物的3′端开始以从5′→3′端的方向延伸，合成与模板互补的DNA链。

每一循环经过变性、退火和延伸，DNA含量即增加一倍。

有些PCR因为扩增区很短，即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成，因此可以改为两步法，即退火和延伸同时在60℃-65℃间进行，以减少一次升降温过程，提高了反应速度。

⑸ PCR仪的内部构造及工作原理是什么

顶楼上，就是一个升温降温的机子。升降温速度越快，性能越好。

PCR的工作原理是变性 退火 延伸 三个步骤，这三步需要不同的温度，而PCR仪就是能达到这样目的的一个装置

⑹ 我问下PCR仪上显示的这个是什么意思啊

这些程序的意思是：
94°C 3min （预变性）94°C 30s （变性）52°C 30s （退火）72°C 30s （延伸）
GOTO 2 ,是指第一次完成到72°C之后,接下来回回到第二步,30个循环答.
最后72°C 1min.HOLD 10°C,是指PCR完成之后,如果你没有及时把东西拿出来,仪器会保持在10°C,是对产物的一种保护.

⑺ PCR仪器怎么用

回答即可得2分，回答被采纳则获得悬赏分以及奖励20分 PCR 仪480使用标准操作流程
发布时间：2007-8-9 浏览次数：153次
原理：聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)是一种选择性体外扩增DNA或RNA片段的方法，在微生物感染的诊断中具有重要的价值。在PCR扩增过程中，扩增的DNA产量是呈指数上升的，经过n个循环的扩增，一个DNA分子的产量便达到2n个拷贝。PCR产物一般为1013拷贝/ml，取0.1ml即为109拷贝，而1mg人基因组DNA才含1.4´106拷贝的单拷贝基因片段，因此使得PCR扩增反应具有强大的扩增能力，提高了检测的敏感性。此外，利用PCR反应，还能够对感染因子实施定量分析，实时监测其在宿主体内的动态变化，有利于指导临床诊疗。

主体内容（操作步骤，必填项目）：
开启PCR仪电源至ON 位置；屏幕显示版本信息后，出现step to edit file# 3.
SOAK file# 1的编辑：
file# 1是在某一温度下持续无限长时间，即只可修改温度。按 file →1→Enter键；显示SOAK temperature （0-100） 25℃；可根据实验需要修改温度，如要30℃，按3，0，再按Enter键，显示End of file，RUN-STORE-PRINT, 按NO，使光标至store 的下方，按Enter 或yes键显示：File store Enter user# 选择自己的数码代号，按数字键盘后，按Enter键，显示: file store Enter file#选择空白程序号，按数字键盘，按Enter键，显示 Yes to store User # ××× file # ××× 按yes键，此号即为用户存储程序。
Time delay File # 2 的编辑：
Time delay file #是在某一温度下保温有限时间，按 file →2→Enter键，显示：Time delay File Step to edit file # 2 按step 键，显示 delay time (0-999) 7 min 0 sec 按要求修改后按enter键，调好min, sec后，显示beep while delay? NO- YES, 按NO→Enter，显示 link to a stored file, 若无需连接，按0→Enter, 按NO，让光标停留在store 下方，按Enter, 按自己的数码代号，按Enter, 按程序代号，按 yes (yes to store)。
File # 3 的编辑：
File # 3是温度循环，温度上升和下降比File # 4慢，编此程序大致同File # 4。
File # 4的编辑：
File # 4是程序循环，温度上升和下降快。按File → 4→Enter,显示 step- cycle file Step to edit File # 4, 按step, 显示：seg1 target temperature 94℃，如需修改则按数字键后，按enter, 否则直接按enter, 显示：seg1 segment time （0-999）1 min 0 sec 修改好min, sec 后，按enter,显示：seg2 target temperature 37℃ 温度时间修改方法同上，完成后按enter, 显示：seg3 target temp 72℃, 温度时间修改同上，seg 4 全部按0, 按 enter,显示：auto seg extension NO- YES, 按NO，显示：auto seg extension，NO- YES，
按enter(step/yes) 回答 yes, 显示： extension per cycle （0-59）1 如果每个循环是延长1 sec, 按enter, 否则修改后按enter 键，显示：cycle count （1-99）25，修改后， 按 enter 键，显示 link to store file (0-99, 0= shut off) 0，若不与其它程序连接则按0，enter. 若与其它程序连接则按程序号，按enter, end of file RUN –STORE-PRINT 按NO，光标至 STORE 下方，按ENTER，显示： file store enter file # 按程序代码，按enter, 显示 yes to store User # ××× file # ×××按YES.

清除程序
按 file →所要清除的程序号→enter, 按file →clear, 显示 file # ×× deleted, enter new file #, 这样你所需要清除的程序被清楚，这一空白程序则可编入新程序。

引用文献：
本研究所操作规程和网上搜索

⑻ pcr仪的用途是啥子

polymerase chain reaction (PCR)
PCR技术类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物,由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成

⑼ 实时荧光PCR仪器的原理

实时荧光定量pcr仪器怎么用的
用已知浓度的dna样本（通常是质粒）梯度内稀释成一系列的样本。容做实验的时候，这些标准品和待测样本加在同样一块96孔盘的不同孔内。一起做pcr。
标准品的荧光强度和已知的浓度作图，可以得到一条标准曲线。而待测样本的荧光强度测出以后，就可以在标准曲线上算出样本浓度了。

⑽ PCR仪的获得诺贝尔奖的PCR技术

1993年，美国科学家Mulis众望所归地获得了诺贝尔化学奖，他所取得的成就是发明了PCR技术。
PCR，中文译为聚合酶链式反应，其实是一种DNA的快速扩增技术，其扩增效率之高就象核裂变的“链式反应”那样。PCR技术通过两个短的称为引物的DNA小片段和一种耐热的酶的作用，可以在3个小时内把特定的DNA量提高1000万倍。这种技术一问世，立刻引起了分子生物学研究的一场革命，人们利用这种轰动全世界的技术很快就把微观领域的生物学研究大大地往前推了一步。可以这么说，PCR技术使分子生物学研究一下子获得了突破，而且随着PCR技术的日趋完善，PCR在人类社会生活中的应用也越来越广泛。比如说在“DNA指纹”中我们提到，科学家们只需要一根头发甚至一个细胞就可以完成DNA指纹的鉴定工作，这里实际上就要采用PCR技术，因为一个细胞中的DNA含量实在太少了，人们根本不可能检测到它的指纹；有了PCR技术就好办了，通过PCR技术把这个细胞中的DNA片断扩增1000万倍，这样DNA量就足够作指纹鉴定了。再比如，在医院里检验血液中的某种病毒，有时病毒量极少（例如有的艾滋病病毒携带者），通过传统的检查方法费力又费时，这时PCR技术也许就可以帮上忙。可以先选定这种病毒DNA上的一段DNA，设计合适的引物DNA，然后通过PCR技术一扩增很快就可以判断出血样中是否扩增出了大量的DNA，如果是的话，那么就说明血样中带有该种病毒了。PCR方法不但有极高的灵敏度，而且可以同时一次做近百个扩增反应，省时省力效率高。
PCR技术神奇就神奇在以下几个特点上：一是被扩增的DNA所需量极小，理论上讲一个分子就可以用于扩增了；二是扩增效率高，目的基因的量成指数形式扩增，几个小时就扩增1000万倍以上。现在PCR技术已经被广泛地应用于生命科学研究、食品卫生、医疗、法医及环境监测等诸多方面，真不愧是“获得诺贝尔奖”的好技术！