微生物检测仪器包括哪些
1. 微生物细菌总数测定会用到的所有仪器有什么
一、菌落总数介绍:
菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。
菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等)每克(每毫升)检样所生长出来的细菌菌落总数。按国家标准方法规定,即在需氧情况下,37℃培养48h,能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数,所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生长。因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等。
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量,它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求,以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。
二、检验方法
菌落总数的测定,一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度下,培养一定时间后(一般为48小时),记录每个平皿中形成的菌落数量,依据稀释倍数,计算出每克(或每ml)原始样品中所含细菌菌落总数。
基本操作一般包括:样品的稀释--倾注平皿--培养48小时--计数报告。
国内外菌落总数测定方法基本一致,从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无何明显不同,只是在某些具体要求方面稍有差别,如有的国家在样品稀释和倾注培养进,对吸管内液体的流速,稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等均作了比较具体的规定。
检验方法参见:
GB4789.2-94 《中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 菌落总数测定》
SN0168-92 《中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品菌落计数》
三、说明
(一)样品的处理和稀释:
1.操作方法:以无菌操作取检样25g(或25ml),放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振要或研磨制成1:10的均匀稀释液。
固体检样在加入稀释液后,最好置灭菌均质器中以8000~10000r/min的速度处理1min,制成1:10的均匀稀释液。
用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混合均匀,制成1:100的稀释液。
另取1ml灭菌吸管,按上项操作顺序,制10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次即换用1支1ml灭菌吸管。
2.无菌操作:操作中必须有“无菌操作”的概念,所用玻璃器皿必须是完全灭菌的,不得残留有细菌或抑菌物质。所用剪刀、镊子等器具也必须进行消毒处理。样品如果有包装,应用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。
操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌室进行。琼脂平板在工作台暴露15分钟,每个平板不得超过15个菌落。
3.采样的代表性:如系固体样品,取样时不应集中一点,宜多采几个部位。固体样品必须经过均质或研磨,液体样品须经过振摇,以获得均匀稀释液。
4.样品稀释误差:为减少样品稀释误差,在连续递次稀释时,每一稀释液应充分振摇,使其均匀,同时每一稀释度应更换一支吸管。
在进行连续稀释时,应将吸管内液体沿管壁流入,勿使吸管尖端伸入稀释液内,以免吸管外部粘附的检液溶于其内。
为减少稀释误差,SN标准采用取10mL稀释液,注入90mL缓冲液中。
5.稀释液:样品稀释液主要是灭菌生理盐水,有的采用磷酸盐缓冲液(或0.1%蛋白胨水),后者对食品已受损伤的细菌细胞有一定的保护作用。如对含盐量较高的食品(如酱油)进行稀释,可以采用灭菌蒸馏水。
(二)倾注培养
1.操作方法:根据标准要求或对污染情况的估计,选择2~3个适宜稀释度,分别在制10倍递增稀释的同时,以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做两个平皿。
将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约15ml,并转动平皿,混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空白对照。
待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h,取出计算平板内菌落数目,乘以稀释倍数,即得每克(每毫升)样品所含菌落总数。
2.倾注用培养基应在46℃水浴内保温,温度过高会影响细菌生长,过低琼脂易于凝因而不能与菌液充分混匀。如无水浴,应以皮肤感受较热而不烫为宜。
倾注培养基的量规定不一,从12~20ml不等,一般以15ml较为适宜,平板过厚可影响观察,太薄又易于干裂。倾注时,培基底部如有沉淀物,应将底部弃去,以免与菌落混淆而影响计数观察。
3.为使菌落能在平板上均匀分布,检液加入平皿后,应尽快倾注培养基并旋转混匀,可正反两个方向旋转,检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过20min,以防止细菌有所死亡或繁殖。。
4.培养温度一般为37℃(水产品的培养温度,由于其生活环境水温较低,故多采用30℃)。培养时间一般为48h,有些方法只要求24h的培养即可计数。培养箱应保持一定的湿度,琼脂平板培养48h后,培养基失重不应超过15%。
5.为了避免食品中的微小颗粒或培基中的杂质与细菌菌落发生混淆,不易分辨,可同时作一稀释液与琼脂培基混合的平板,不经培养,而于4℃环境中放置,以便计数时作对照观察。
在某些场合,为了防止食品颗粒与菌落混淆不清,可在营养琼脂中加入氯化三苯四氮唑(TTC),培养后菌落呈红色,易于分别。
(三)计数和报告
1.操作方法:培养到时间后,计数每个平板上的菌落数。可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平板的菌落总数后,求出同稀释度的各平板平均菌落数,计算处原始样品中每克(或每ml)中的菌落数,进行报告。
2.到达规定培养时间,应立即计数。如果不能立即计数,应将平板放置于0-4℃,但不得超过24h。
3.计数时应选取菌落数在30~300之间的平板(SN标准要求为25~250个菌落),若有二个稀释度均在30~300之间时,按国家标准方法要求应以二者比值决定,比值小于或等于2取平均数,比值大于2则其较小数字(有的规定不考虑其比值大小,均以平均数报告)。
4.若所有稀释度均不在计数区间。如均大于300,则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。如均小于30,则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告之。如菌落数有的大于300,有的又小于30,但均不在30~300之间,则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。如所有稀释度均无菌落生长,则应按小于1乘以最低稀释倍数报告之。有的规定对上述几种情况计算出的菌落数按估算值报告。
5.不同稀释度的菌落数应与稀释倍数成反比(同一稀释度的二个平板的菌落数应基本接近),即稀释倍数愈高菌落数愈少,稀释倍数愈低菌落数愈多。如出现逆反现象,则应视为检验中的差错(有的食品有时可能出现逆反现象,如酸性饮料等),不应作为检样计数报告的依据。
6.当平板上有链状菌落生长时,如呈链状生长的菌落之间无任何明显界限,则应作为一个菌落计,如存在有几条不同来源的链,则每条链均应按一个菌落计算,不要把链上生长的每一个菌落分开计数。如有片状菌落生长,该平板一般不宜采用,如片状菌落不到平板一半,而另一半又分布均匀,则可以半个平板的菌落数乘2代表全平板的菌落数。
7.当计数平板内的菌落数过多(即所有稀释度均大于300时),但分布很均匀,可取平板的一半或1/4计数。再乘以相应稀释倍数作为该平板的菌落数。
8.菌落数的报告,按国家标准方法规定菌落数在1~100时,按实有数字报告,如大于100时,则报告前面两位有效数字,第三位数按四舍五入计算。固体检样以克(g)为单位报告,液体检样以毫升(ml)为单位报告,表面涂擦则以平方厘米(cm2)报告。
2. 微生物快速检测仪器的介绍
RVLM微生物快速检测仪是为客户在微生物检测方面的需要和需求提供创新的解决方案·整套版RVLM微生物快权速检测系统包含了检测仪器及电脑软件和专配的检测瓶·该产品得到美国EPA、美国军方、加拿大政府和贝尔实验室等权威机构的认可和广泛应用
3. 微生物实验室需要哪些常用的仪器
微生物实验室主要用于无菌环境下微生物提纯、分离、增殖及鉴定等工作,对无菌环境的要求很高。那么微生物实验室中则需要用到以下仪器设备。
一、无菌室
无菌室是实验室的核心部分,主要为样品提供保护,保证实验结果的准确和人员的安全。
二、超净工作台
微生物的培养都是在特定培养基中进行无菌培养,那么无菌培养必然需要超净工作台提供一个无菌的工作环境。超净工作台的主要用途是微生物的接种及处理时的无菌操作。
三、高压蒸汽灭菌锅
高压蒸汽灭菌锅是一个密闭的、可以耐受一定压力的双层金属锅。一般在进行无菌操作前需要将操作器皿、培养基等在高压灭菌锅里进行灭绝后才能使用。
四、培养箱
培养箱主要用于实验室微生物的培养,为微生物的生长提供一个适宜的环境。培养箱有以下几种:
1、普通培养箱
2、生化培养箱
3、恒温恒湿箱
4、厌氧培养箱
五、天平
天平是用于精确称量各类试剂及药品的设备。实验室常用的是电子天平。
六、微波炉/电炉
其主要作用是用于溶液的快速加热,微生物固体培养基的加热溶化等。
七、摇床
摇床又称摇瓶机,它是培养好气性微生物的小型试验设备或作为种子扩大培养之用。
八、冰箱
冰箱是实验室中保存试剂和样品必不可少的仪器。微生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存,有些要求是负20度保存,实验人员一定要看清试剂的保存条件,放置在恰当的温度下保存。
九、显微镜
微生物个体微小,必须借助显微镜才能观察清楚它们的个体形态和细胞结构。因此,在微生物学的各项研究中,显微镜就成为不可缺少的工具。
十、生物安全柜
微生物实验中所涉及到的部分试剂和样品微生物有些是有毒的,对于操作人员来说伤害比较大。为了防止有害德悬
十一、菌落计数器
菌落计数仪可帮助操作者计数菌落数量。通过放大,拍照,计数等方式来准确的获取菌落的数量。有些高性能的菌落计数器还可直接连接电脑来完成自动计数的操作,方便快捷的计数。
十二、分光光度计
分光光度计在微生物试验中用于测定微生物悬液的浓度,可以正确选取合适的培养时间。
十三、离心机
离心机是用于收集微生物菌体以及其他沉淀物。有冷冻离心机和常温离心机之分。
十四、液氮罐
液氮罐里装有液氮,可用于微生物实验室中各菌种的长期保存。
4. 测微生物的一般都有什么仪器设备,有什么快速检测设备,价格一般都是多少
光学显微镜和电子显微镜
传统的培养基法、胶体金、酶免法和PCR 法
5. 微生物实验的基本仪器有哪些
玻璃仪器:
三角瓶,玻璃棒,试管,涂布器,接种环,载玻片,盖玻片,酒精灯,回平答板
设备:
微波炉,水浴锅,灭菌锅,干燥箱,超净工作台,电热培养箱(细菌),生化培养箱(真菌),显微镜(配套购买松柏油,擦镜纸)
培养基:
各种基础营养(牛肉膏、蛋白胨等),各种有机无机盐
6. 食品微生物的主要检测指标有哪些实验室必备的仪器有哪些急需,谢谢
菌落抄总数
大肠菌群
致病菌
沙门氏菌
霉菌
致泻大肠埃希氏菌
单核细胞增生李斯特氏菌
必备的出厂检验设备
(一)分析天平(0.1mg);(二)天平(0.1g);(三)干燥箱;(四)微生物培养箱;(五)无菌室或超净工作台;(六)灭菌锅;(七)生物显微镜。
7. 请教各位,食品微生物检测所需仪器有哪些
主要看你想要检测什么,种类,数量等等?
一般的话也有很多的。比如:棉签,消过毒的试管,蛋白胨水,培养皿,显微镜,培养箱,各种营养基和化学试剂,火焰灯,灭菌锅,超净工作台等等等等,太多了啊。。。主要看你想要干什么
8. 微生物快速检测仪器的检测仪器
RVLM微生物快速检测仪是为客户在微生物检测方面的需要和需求提供创新的解决方案.整套RVLM微生物快速检测系统包含了检测仪器及电脑软件和专配的检测瓶.该产品得到美国EPA、美国军方、加拿大政府和贝尔实验室等权威机构的认可和广泛应用
主要特点:
1)可检测固态、液态、表面、膏状、浆状样本;
2)样本在检测时无需任何的前处理过程,直接丢入摇摇瓶即可;
3)检测样本只需1ml/1g;同一温度下可同时检测8个样品;
4)灵敏度高达可检测到1目标微生物;特异性高达99.999%;
5)简单三个操作步骤,傻瓜型,无需专业操作人员;
6)仪器便携式,可直接连接电脑出定量分析检测报告,并可随时随地进行检测、100%定量分析。
7)检测瓶使用后安全丢弃-和过期药物同样处理。
检测原理及方法:
集传统检验方法优点于一身:-培养皿法-酶法(β-葡萄糖苷酸酶分析)-免疫法(抗原搜寻)-基因法(基因搜寻)
检测范围:
活细菌总数
大肠菌群/大肠杆菌/大肠杆菌O157, O111, O104...等
肠道杆菌科
金黄色葡萄球菌
铜绿假单胞菌;绿脓杆菌
沙门氏菌
李斯特菌
肠球菌
曲霉属真菌;曲霉菌属
酵母菌
应用范围:卫生控制: -食品(HACCP) -厨房、工具、表面(HACCP) -水质 -(CDC)疾病控制、进出口检验检疫 -药品及化妆品 与我们的生活息息相关,例如: 咖啡馆、餐厅 水源检测、制水厂 分析实验室和HACCP诊断 农产品及相关加工公司 药厂、药房、化妆品厂 环境监测机构 水配送公司 消费者保护团体、工商管理机构 室内空调调节公司
9. 微生物实验室常用仪器设备清单
从实验复室工作流程来看,微生物制实验室可分为样品保存、样品前处理、过程分析、清洗灭菌四个流程,不同的工作流程需要不同的仪器。
一、样品保存
1、 超低温冰箱:低温保存疫苗、菌种、生物样本等
2、 液氮罐:长期活性保存疫苗、菌毒种、细胞
3、 药品冷藏箱:用于冷藏保存药品、试剂、生物制品和疫苗
二、样品前处理
1、 移液器:定量转移液体的器具
2、 离心机: 液固或液液颗粒分离
3、 冻干机: 冻结的水分子直接升华水蒸气
4、 均质仪: 提取样品中DNA/RNA/蛋白质
5、 培养箱: 培养微生物、植物和动物细胞
6、 生物安全柜: 实验操作中空气净化负压安全装置
7、 超净工作台: 局部工作区域洁净度
三、过程分析
1、 PCR仪:用于传染病的诊断、基因复制以及亲子鉴定
2、 酶标仪:酶联免疫吸附试验的专用仪器
3、 核酸提取仪:核酸提取试剂自动完成样本核酸提取
4、 暗箱式紫外分析仪:于核酸、蛋白电泳凝胶,薄层层板结果的观察分析
5、 电泳仪:用于DNA 测序
四、清洗灭菌
1、 高压灭菌锅:实验前后杀菌
2、 超声波清洗机:清洗实验器具及玻璃器皿
10. 检验食品中微生物需要哪些仪器设备请具体说明下,
微生物实验室常自用仪器
1.无菌室和超净工作台
2.培养箱:生化培养箱、普通培养箱、恒温培养箱、厌氧培养箱
3.恒温干燥箱
4.高压蒸汽灭菌器
5.天平:电子天平(精确度为千分之一或万分之一)或分析天平
6.显微镜:
7.分光光度计(测定菌体生长量)
8.酸度计
9.恒温水浴锅
10.冰箱:普通冰箱、低温冰箱
11.离心机
12.均质器
13.振荡培养摇床
14.厌氧培养设备
15.水净化设备
16.通风设备
17.电炉或微波炉
18.磁力搅拌器
19.血球计数板、目镜测微尺、镜台测微尺、手掀计数器
20.菌落计数器
21.常用的玻璃仪器:(各种型号)试管、培养皿、三角瓶、试剂瓶、移液管、胶头滴管、载玻片、盖玻片、漏斗、烧杯、量筒、镊子、接种环、酒精灯、玻璃棒等
22.常用药品:(注:根据实验所需)
23.多媒体教学设备